【摘 要】
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目的 观察淋巴细胞与肝癌细胞(HepG2)共培养后超微结构的变化,旨在探讨淋巴细胞在肿瘤免疫逃逸过程中的作用.方法 将分离自健康人外周血的淋巴细胞与HepG2共培养,以HepG2细胞
【机 构】
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南方医科大学附属佛山医院 肝胆外科,广东 佛山 528000;湘南学院附属医院胃肠外科,湖南 郴州 423000;南方医科大学附属佛山医院检验科,广东 佛山 528000
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目的 观察淋巴细胞与肝癌细胞(HepG2)共培养后超微结构的变化,旨在探讨淋巴细胞在肿瘤免疫逃逸过程中的作用.方法 将分离自健康人外周血的淋巴细胞与HepG2共培养,以HepG2细胞与淋巴细胞直接接触培养为直接共培养组,以HepG2细胞与淋巴细胞在Transwell小室中间接培养为间接共培养组,以淋巴细胞单独培养为对照组.通过原子力显微镜对各组淋巴细胞进行扫描成像,表征细胞形貌和细胞超微结构,并对细胞膜表面的粗糙度进行测量和分析.结果 单个细胞的形貌图显示,对照组细胞为圆形,形态饱满,中间隆起,大小为8.063μm×1.306μm;直接、间接共培养后细胞明显缩小,胞体塌陷,大小分别为6.281μm×0.729μm及10.310μm×0.601μm.细胞超微结构图显示,对照组细胞表面光滑,膜表面颗粒粒径小,分布在9.2～73.8 nm;直接、间接共培养组细胞表面凹凸不平,甚至孔洞形成,膜表面颗粒粒径增大,分别分布在30.1～135.0 nm及64.5～258.0 nm.细胞膜表面粗糙度分析显示,对照组高低差(Rp-v)为(95.59±12.06)nm,均方根粗糙度(Rq)为(12.10±0.82)nm,平均粗糙度(Ra)为(10.08±0.97)nm,平均高度(Mean Ht)为(47.37±12.01)nm;间接共培养组Rp-v、Rq、Ra和Mean Ht分别为(158.34±12.98)、(21.76±1.06)、(19.45±4.39)和(90.88±12.20)nm,直接共培养组Rp-v、Rq、Ra和Mean Ht均增加,分别为(313.82±41.08)、(39.41±11.31)、(31.33±10.43)和(153.04±15.32)nm,差异有统计学意义,P<0.01.结论 肝癌细胞HepG2诱导淋巴细胞出现细胞萎缩、胞体塌陷、细胞膜表面粒径增大、粗糙度增加及孔洞形成.
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