【摘 要】
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目的 研究非编码RNA淋巴结转移相关转录本1/细胞黏附分子1(LNMAT1/CADM1)调控轴对前列腺癌(prostate adenocarcinoma,PRAD)细胞侵袭和免疫抑制因子表达水平的影响.方法 收集
【机 构】
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161000,齐齐哈尔医学院附属第三医院泌尿外科男科门诊;161000,齐齐哈尔医学院附属第三医院教务科;161000,齐齐哈尔医学院附属第三医院口腔科
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目的 研究非编码RNA淋巴结转移相关转录本1/细胞黏附分子1(LNMAT1/CADM1)调控轴对前列腺癌(prostate adenocarcinoma,PRAD)细胞侵袭和免疫抑制因子表达水平的影响.方法 收集临床PRAD和癌旁(TAC)的组织.构建LNMAT1的慢病毒短发夹RNA(shRNA)载体和阴性对照(NC-shRNA)、CADM1 siRNA(si-CADM1)和阴性对照(NC-siRNA)并转染人高转移性前列腺癌细胞PC-3M.PC-3M细胞处理分组为:NC-shRNA组、LNMAT1 shRNA组、LNMAT1 shRNA+si-CADM1组、LNMAT1 shRNA+NC-siRNA组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测PRAD组织、TAC组织、人前列腺上皮细胞RWPE-1、人前列腺癌细胞DU145、PC-3M中的LNMAT1和CADM1的表达.RT-qPCR检测PC-3M分组中LNMAT1、CADM1、MMP-2,MMP-9,E-cadherin和N-cadherin的水平.蛋白免疫印迹法检测PC-3M分组中CADM1、TGF-β、IL-10、VEGF-A、FasL、HLA-G的水平.伤口愈合检测PC-3M细胞的迁移率,Transwell法检测细胞侵袭率.结果 LNMAT1在PC-3M细胞和有淋巴转移的PRAD组织中上调(均为P＜0.05);沉默LNMAT1不仅抑制PC-3M细胞侵袭和迁移能力(均为P＜0.05),下调MMP-2、MMP-9、N-cadherin的mRNA水平(均为P＜0.05),而且上调E-cadherin的mRNA(P＜0.05).另外,沉默LNMAT1抑制PC-3M细胞免疫抑制因子TGF-β、IL-10、VEGF-A、FasL、HLA-G的蛋白水平(均为P＜0.05);LNMAT1负调控PC-3M细胞中CADM1的表达(P＜0.05);沉默CADM1显著逆转PC-3M细胞中LNMAT1对侵袭和免疫抑制因子的抑制能力(均为P＜0.05).结论 本研究阐明LNMAT1/CADM1调控轴可影响高转移性PRAD细胞的侵袭和免疫抑制因子.
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