【摘 要】
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目的 探讨血小板（PLT）储存过程中microRNA（miRNA）的表达变化，PLT功能相关蛋白表达情况，以及与PLT聚集功能的关系。方法 采集机采PLT于（22±2）℃下震荡保存，使用miRNA表达谱芯片检测PLT内miRNA表达及变化。实时荧光定量PCR（qPCR）检测机采PLT储存过程中与聚集功能相关的miRNA表达变化。流式细胞术（FCM）检测PLT凋亡率、PLT内VASP、P2Y12和G
【机 构】
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广州市第一人民医院输血科广东省精准输血技术工程研究中心
【基金项目】
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广州市科技计划项目（No.201904010027、202002030427）； 广州市临床重大项目（No.2019ZD18）资助；
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目的 探讨血小板（PLT）储存过程中microRNA（miRNA）的表达变化，PLT功能相关蛋白表达情况，以及与PLT聚集功能的关系。方法 采集机采PLT于（22±2）℃下震荡保存，使用miRNA表达谱芯片检测PLT内miRNA表达及变化。实时荧光定量PCR（qPCR）检测机采PLT储存过程中与聚集功能相关的miRNA表达变化。流式细胞术（FCM）检测PLT凋亡率、PLT内VASP、P2Y12和GPⅡb/Ⅲa。结果 对比储存第2天与第5天PLT miRNA表达结果，47种miRNA表达上调，120种下调。储存第8天与第2天相比，28种表达上调，202种下调。变化的miRNA的靶基因主要与PLT脱粒、激活及血小板生长因子（PDGF）受体信号通路有关。其中储存第5天时PLT聚集相关的miR-155、miR-21-5p和miR-21-3p表达下调（P<0.05），而let-7b、miR-223和miR-3162表达上调（P<0.05）。在（22±2）℃条件下保存的PLT凋亡率随储存天数增加逐步升高。在储存过程中，P2Y12活化程度增高，导致VASP去磷酸化增加，而GPⅡb/Ⅲa含量则在储存的过程中相对稳定。结论 大量的miRNA存在于PLT中，且表达量随着PLT保存时间增加而发生变化。这些miRNA的表达变化能影响相应的蛋白水平并最终导致PLT的聚集功能和凋亡发生变化，特定miRNA表达变化具有作为PLT储存损伤的生物学标记可能。
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