【摘 要】
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目的 探讨蛋白激酶B(PKB,又称Akt)调控的p53蛋白直接线粒体转移在顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用及与卵巢癌顺铂耐药的关系.方法 应用Western blot检测顺铂作用前后卵巢癌
【机 构】
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首都医科大学附属北京妇产医院生殖医学科,中国科学院动物所生殖生物学国家重点实验室
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目的 探讨蛋白激酶B(PKB,又称Akt)调控的p53蛋白直接线粒体转移在顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡中的作用及与卵巢癌顺铂耐药的关系.方法 应用Western blot检测顺铂作用前后卵巢癌顺铂敏感细胞OV2008、A2780s和顺铂耐药细胞C13*、A2780cp中线粒体和全细胞中p53含量.分离纯化线粒体,检测卵巢癌敏感细胞与耐药细胞p53直接线粒体作用的差异;应用Hoechst染色法检测卵巢癌细胞的凋亡率,将Akt1/2 siRNA导入耐药细胞C13*细胞中,观察p53线粒体转移作用和细胞凋亡率的改变.结果 顺铂能引起p53进入OV2008和A2780s细胞的线粒体中,但不能进入C13*和A2780cP细胞的线粒体.过度表达活化的Akt2能抑制p53进入A2780s细胞的线粒体;下调Akt后,可使p53进入C13*细胞的线粒体,同时C13*细胞对顺铂的敏感性增加.结论 顺铂能引起卵巢癌敏感细胞中p53转移至线粒体,Akt导致的卵巢癌化疗耐药在一定程度上是Akt对p53直接线粒体作用的抑制.下调Akt的表达能使卵巢癌化疗耐药细胞的p53直接线粒体作用增强,耐药性得到一定程度的逆转.
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