【摘 要】
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多巴色素异构酶(dopachrome tautomerase,Dct)是酪氨酸酶家族的重要成员之一,在黑色素合成过程中具有重要作用.为了解多巴色素异构酶基因(Dct)对鲤的黑色体色的影响,本研究以
【机 构】
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上海海洋大学农业农村部淡水水产种质资源重点实验室,上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心,上海海洋大学上海水产养殖工程技术研究中心,上海 201306
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多巴色素异构酶(dopachrome tautomerase,Dct)是酪氨酸酶家族的重要成员之一,在黑色素合成过程中具有重要作用.为了解多巴色素异构酶基因(Dct)对鲤的黑色体色的影响,本研究以瓯江彩鲤(Cyprinus carpio var.color)的“粉花”体色类型为研究对象,在对该基因进行克隆和表达分析的基础上,应用CRISPR/Cas9基因编辑技术研究了该基因对瓯江彩鲤黑斑体色的影响.结果发现,瓯江彩鲤存在2个Dct基因(Dct1、Dct2),它们的CDS长度均为1548 bp,共编码515个氨基酸,均包含8个外显子;Dct1与Dct2的核苷酸序列相似度为95.55％,氨基酸序列相似度为94.95％.荧光定量PCR结果显示,基因Dct1在“粉花”体色瓯江彩鲤的黑斑皮肤中的表达量显著高于白色皮肤,而Dct2在白色皮肤中的表达量却显著高于黑斑皮肤(P<0.05).应用CRISPR/Cas9技术同时对两个基因敲除结果显示,Dct1和Dct2高度突变的瓯江彩鲤皮肤中的黑色素细胞呈点状,树突结构退化,表现出黑斑面积缩小、黑色斑块不明显现象.本研究表明,Dct基因突变对瓯江彩鲤黑斑体色存在重要影响,与Dct2相比,Dct1在鲤的黑斑体色形成中发挥着更大的作用.
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