【摘 要】
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目的研究血管生成素相关蛋白2重组腺病毒(Ad．ARP2)体外的转染效率、产物表达和其表达产物对血管内皮细胞分化的作用。方法体外培养扩增ICR小鼠心脏冠状动脉毛细血管内皮细胞(C
【机 构】
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解放军第二军医大学附属长海医院心脏内科,解放军第二军医大学附属长海医院心脏内科,解放军第二军医大学附属长海医院心脏内科,解放军第二军医大学附属长海医院心脏内科,
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目的研究血管生成素相关蛋白2重组腺病毒(Ad．ARP2)体外的转染效率、产物表达和其表达产物对血管内皮细胞分化的作用。方法体外培养扩增ICR小鼠心脏冠状动脉毛细血管内皮细胞(CMECs),通过免疫荧光染色评价人腺病毒转染CMECs的转染效率;应用Western blot和ELISA方法检测ARP2在细胞的内表达和分泌,并分别与对照组[空病毒载体(Ad．Null)组和PBS组]比较。观察种植在Matrigel凝胶上分别转染Ad．ARP2和Ad．Null的CMECs的生长状态。结果腺病毒转染倍数为200时,转染效率为93．5％,且对细胞生长无影响。Ad．ARP2转染CMECs后有ARP2蛋白表达,ELISA检测第1、2、3、5、8 d的ARP2分泌量分别为76．0±1．7、490．1±9．5、389.6±2．5、240．1±1．1、73．4±1．3 pg／ml,而对照组未检测到有ARP2蛋白表达和分泌。含有ARP2的培养上清能促进血管内皮细胞分化。结论腺病毒可以安全、有效地转染CMECs,其携带ARP2基因可获得高水平表达,并能促进血管内皮细胞分化。
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