【摘 要】
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为建立虎杖高效遗传转化体系,用携带有植物表达载体pCAMBIA1301的发根农杆菌ATCC15834侵染虎杖无菌苗获得毛状根.对影响虎杖毛状根诱导的因素(如外植体种类、农杆菌活力、培
【机 构】
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长江大学生命科学学院,湖北荆州 434025;长江大学园艺园林学院,湖北荆州 434025
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为建立虎杖高效遗传转化体系,用携带有植物表达载体pCAMBIA1301的发根农杆菌ATCC15834侵染虎杖无菌苗获得毛状根.对影响虎杖毛状根诱导的因素(如外植体种类、农杆菌活力、培养基种类、超声波辅助时间)进行优化,以获得最佳培养条件;通过潮霉素筛选阳性毛状根,以确定最佳潮霉素浓度.结果表明:以叶片为外植体、1/2MS为培养基、菌液OD600=0.8、超声波辅助5 s时,虎杖遗传转化毛状根效果最佳;筛选出的毛状根经GUS染色和PCR分子鉴定,该方法的阳性转化率为92％.该研究优化了虎杖毛状根的培养条件,为后期试验探究建立了更加高效的虎杖转基因体系.
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