【摘 要】
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[目的]探讨miR-330-5p是否靶向TNFRSF14调控乳腺癌细胞MCF-7的凋亡.[方法]在过表达或敲低miR-330-5p的情况下,通过Western Blot检测TNFRSF14 及PI3K通路蛋白表达情况.通过CCK
【机 构】
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雅安市人民医院,四川雅安625000 ;大连大学附属新华医院,辽宁大连116000
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[目的]探讨miR-330-5p是否靶向TNFRSF14调控乳腺癌细胞MCF-7的凋亡.[方法]在过表达或敲低miR-330-5p的情况下,通过Western Blot检测TNFRSF14 及PI3K通路蛋白表达情况.通过CCK-8试验检测乳腺癌细胞MCF-7的细胞活力.使用Annexin-V染色检测乳腺癌细胞MCF-7的凋亡水平.TargetScan在线分析miR-330-5p与TNFRSF14是否匹配,其次将TNFRSF14的3′UTR克隆进pMir-Glo miRNA载体,利用双荧光素酶报告系统检测miR-330-5p是否靶向调控TNFRSF140[结果]敲低miR-330-5p后,TNFRSF14、Caspase3-p17的表达量上升,p-AKT、P70的表达量下降,乳腺癌细胞MCF-7的细胞活力下降(P<0.05)、凋亡水平上升(P<0.05);过表达miR-330-5p 后,TNFRSF14、Caspase3-p17的表达量下降,p-AKT、P70的表达量上升,乳腺癌细胞MCF-7的细胞活力上升(P<0.05)、凋亡水平下降(P<0.05).miR-330-5p靶向TNFRSF14的3′UTR的24-30的位置.此外,miR-330-5p抑制多种乳腺癌细胞的凋亡和TNFRSF14的表达,包括ZR-75-1、ZR-75-30、BC-009、BC-019、BC-020、MDA-MB-435、MDA-MB-468.[结论]miR-330-5p表达能够明显促进ER阳性HER2阴性乳腺癌细胞的增殖、抑制细胞凋亡,且TNFRSF14及P13K通路可能是其重要的靶基因.该研究为ER阳性HER2阴性乳腺癌的分子机制提供了新依据,为miR-330-5p可能成为新的治疗靶点提供了理论依据.
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