【摘 要】
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目的 探讨LncRNA CEBPA-AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制.方法 原代分离培养人正常皮肤成纤维细胞与瘢痕疙瘩成纤维细胞,采用RT-qPCR法检测CEBPA-AS1与miR-194-3p表达;si-NC、si-CEBPA-AS1、si-CEBPA-AS1与anti-miR-NC、si-CEBPA-AS1与anti-miR-194-3p分别转染瘢痕疙瘩成纤维细胞(si-NC组、si-CEBPA-AS1组、si-CEBPA-AS1+anti-miR-NC组、si-CEBPA-AS
【机 构】
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青海省第五人民医院烧伤整形科,西宁810000
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目的 探讨LncRNA CEBPA-AS1对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移、侵袭的影响及机制.方法 原代分离培养人正常皮肤成纤维细胞与瘢痕疙瘩成纤维细胞,采用RT-qPCR法检测CEBPA-AS1与miR-194-3p表达;si-NC、si-CEBPA-AS1、si-CEBPA-AS1与anti-miR-NC、si-CEBPA-AS1与anti-miR-194-3p分别转染瘢痕疙瘩成纤维细胞(si-NC组、si-CEBPA-AS1组、si-CEBPA-AS1+anti-miR-NC组、si-CEBPA-AS1+anti-miR-194-3p组);采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、迁移及侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测CEBPA-AS1与miR-194-3p的靶向关系;采用Western blotting法检测ProcollagenⅠ、α-SMA、Col1、N-cadherin、E-cadherin蛋白表达.结果 与正常皮肤成纤维细胞比较,瘢痕疙瘩成纤维细胞中CEBPA-AS1表达升高(P<0.05),miR-194-3p表达降低(P<0.05).与si-NC组比较,si-CEBPA-AS1组细胞存活率降低(P<0.05),迁移距离减小(P<0.05),侵袭细胞数减少(P<0.05),ProcollagenⅠ、α-SMA、Col1、N-cadherin蛋白水平降低(P均<0.05),E-cadherin蛋白水平升高(P<0.05).CEBPA-AS1可靶向调控miR-194-3p.与si-CEBPA-AS1+anti-miR-NC组比较,si-CEBPA-AS1+anti-miR-194-3p组miR-194-3p表达降低(P<0.05),细胞存活率升高(P<0.05),迁移距离增加(P<0.05),侵袭细胞数增多(P<0.05),ProcollagenⅠ、α-SMA、Col1、N-cadherin蛋白水平升高(P均<0.05),E-cadherin蛋白水平降低(P<0.05).结论 干扰LncRNA CEBPA-AS1表达可通过靶向调控miR-194-3p而抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、迁移、侵袭.
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