湿地藓LEAFY基因的克隆及原核表达分析

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本研究通过克隆湿地藓(Hyophila javanica) LEA FY基因cDNA和开放阅读框(ORE)全长序列,诱导目的基因表达,旨在明确湿地藓LFY基因的结构特征.采用RT-PCR和RACE的技术克隆得到湿地藓FLORICA ULA/LEA FY的同源基因.该基因cDNA全长为1 402 bp和1 219 bp (HjLFY1和HjLFY2).其开放阅读框(ORF)为1 050 bp,编码349个氨基酸,预测其相对分子质量为40.39 kD.与其它物种的LFY基因氨基酸序列进行同源性比对并构建系统进化树,结果显示,湿地藓LFY基因与小立碗藓LFY基因的亲缘关系最近,同源性达95%.将LFY基因插入pThioHis A载体中,构建pThioHis A/LFY原核表达载体,获得了融合蛋白Trx-LFY,分子量约为53 kD.研究结果为深入探讨其基因结构与功能的关系提供帮助.
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