【摘 要】
：
目的:利用单碱基编辑技术定点修饰MECP2基因T158M位点,获得单一定点突变类型的啮齿类及非人灵长类胚胎,为建立模拟临床上Rett综合征的疾病动物模型奠定基础.方法:利用单碱基
【机 构】
：
昆明理工大学生命科学与技术学院灵长类转化医学研究院 昆明650500云南中科灵长类生物医学重点实验室 昆明650500;
论文部分内容阅读
目的:利用单碱基编辑技术定点修饰MECP2基因T158M位点,获得单一定点突变类型的啮齿类及非人灵长类胚胎,为建立模拟临床上Rett综合征的疾病动物模型奠定基础.方法:利用单碱基编辑技术构建3对T158 M-sgRNA质粒,并分别与BE系统(BE3或BF4max)质粒共转染293T细胞筛选高效的sgRNA,通过显微注射将体外转录的mRNA以不同的浓度组合注射到ICR小鼠和猕猴受精卵中,检测小鼠和猕猴胚胎发育率和编辑效率,评估BE3和BE4max的工作效率及最优浓度组合.结果:小鼠胚胎上BE4max(ng/μl)∶sgRNA (ng/μ1)=100∶50浓度组合时,小鼠胚胎发育率和编辑效率最佳,同时该浓度组合在猕猴胚胎上也获得了有效编辑效率.结论:成功在小鼠及猕猴胚胎上实现了MECP2基因T158M位点上C→T的转变,为后期建立T158M突变的RTT动物模型建立了稳定的胚胎编辑体系.
其他文献
目前,健康体检行业商业创新挑战大于机遇,领军企业须直面多重阻碍:体检售后服务短板亟待弥补,健康数据价值仍需深入挖掘,企业高管战略共识有待达成。对此,赛迪经略研究总监刘
记者从农业农村部了解,上半年,全国第一产业固定资产投资同比增长3.8％,实现企稳回升,先于第二、第三产业回归正增长.其中,畜牧业投资增长48.1％,是农业农村投资恢复的最大动因.r
为更好地贯彻落实党中央、国务院做好“六稳”工作、落实“六保”任务的重要部署,促进农民工能顺畅就业创业,近期,经国务院同意,人力资源社会保障部、农业农村部等15部门印发
研究目的观察学龄儿童眼球生物学参数变化特点,探索儿童眼球发育规律;探讨眼球生物学参数变化与屈光度变化间的相关关系;评估儿童眼正视化过程中屈光状态的变化特征,为近视防
社会多元化和青年人的高速流动，以及各种社会“自组织”的涌现，对共青团有效覆盖青年和引领青年提出了新的课题。为此，作为中国共产党的助手和后备军，从团中央到各地团组织，一直在做着各种探索和实践，其中不乏亮点。 此间，本刊注意到。广东团组织亦有所思考和尝试。 中共中央政治局委员、广东省委书记汪洋对广东团组织提出将“强化共青团的枢纽型社会组织服务作用”作为改革方向。目的依然是吸引并凝聚青年，深入青年之
目的:利用CRISPR/Cas9技术构建Toll样受体4(TLR4)基因敲除小鼠模型,并观察突变小鼠对革兰氏阴性细菌脂多糖(LPS)刺激响应的变化.方法:针对TLR4基因外显子2设计并合成1对sgRNA
在黄海边的江苏省连云港市赣榆区海头镇，白天，街头巷尾，货车在一家家海鲜门市间穿梭忙碌；夜里，渔船归港，看似安静的小镇，开始在互联网空间“热闹”起来。 3000多名网络主播，分散在海头各处，全年彻夜直播带货，然后伴着清晨的浪涛入眠。2018年，海头镇以165亿次的点击量，成为快手播放量第一镇；2019年，全镇电商销售海鲜超过50亿元。 从渔网到互联网，这是新经济时代书写的又一个创富神话。 “三
启动子是控制基因转录的重要元件,也是合成生物学研究和细胞工厂设计的关键环节.糖酵解途径和三羧酸循环是糖类分解代谢的中心代谢,受到包括启动子强度在内的严格调控.为了筛
溶瘤病毒利用肿瘤细胞抗病毒信号通路缺损或病毒受体过表达的特点,实现在其中选择性高复制进而杀伤肿瘤细胞,同时刺激机体产生特异性抗肿瘤免疫反应,是目前肿瘤治疗研究领域
目的:研究Ozanimod(RPC 1063)在少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cell, OPC)分化中的作用,并初步探讨其分子机制.方法:利用免疫吸附法直接分离OPC诱导培养,使用