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目的：构建人Bmi-1基因的真核表达载体pcDNA3．1（＋）-Bmi-1，转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-468细胞中并检测其表达。方法：RT-PCR检测Bmi．1mRNA在乳腺癌细胞系MCF-7及MDA-MB-468细胞中的表达水平；从MCF-7细胞中提取总RNA，逆转录为cDNA，以cDNA为模板，扩增Bmi-1基因序列，将含有Bmi-1全长编码序列的PCR产物经TA克隆后经PCR、酶切验证，亚克隆入真核表达载体pcDNA3．1（＋）中，构建重组质粒pcDNA3．1（＋）-Bmi-1，转化至大肠杆菌