小鼠T细胞活化衔接因子基因真核表达载体的构建

来源 :上海交通大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xq_wang
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目的 构建小鼠T细胞活化衔接因子(LAT)基因的真核表达载体。方法 以小鼠单个核细胞的cDNA为模板,采用PCR扩增LAT基因编码区的全部序列,克隆人真核细胞表达载体pCMV—HA中;测序鉴定目的基因并转染哮喘小鼠脾脏淋巴细胞。结果PCR扩增的特异性片段长度为729bp,并以此构建重组质粒pCMV-HA-LAT。质粒测序结果与GenBank中的小鼠LAT基因cDNA序列一致;转染哮喘小鼠淋巴细胞后可检测到LAT蛋白的表达。结论 成功构建了pCMV-HA—LAT重组真核表达载体。
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