【摘 要】
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目的 探讨RP11-495P10.1在MIT诱导下对肝癌细胞HepG2中DAMPs的释放及细胞免疫原性反应的产生的影响,为肝癌的治疗提供新的免疫治疗手段.方法 CCK-8检测MIT在HepG2细胞中的IC5
【机 构】
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哈尔滨医科大学基础医学院 生物化学与分子生物学教研室 哈尔滨市, 150081;哈尔滨医科大学基础医学院 生物化学与分子生物学教研室 哈尔滨市, 150081;哈尔滨医科大学基础医学院 生物技术实验中
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目的 探讨RP11-495P10.1在MIT诱导下对肝癌细胞HepG2中DAMPs的释放及细胞免疫原性反应的产生的影响,为肝癌的治疗提供新的免疫治疗手段.方法 CCK-8检测MIT在HepG2细胞中的IC50;MIT处理细胞,免疫荧光、ATP试剂盒、流式细胞术、Western印迹检测CRT膜转位、ATP分泌、细胞凋亡及细胞外HMGB1、Cleaved-PARP、p-eIF2α蛋白的表达;MIT处理下调RP11-495P10.1后的细胞,再次检测上述各指标,并用RT-PCR检测RP11-495P10.1的表达.结果 ①MIT引起HepG2细胞的凋亡,Cleaved-PARP蛋白表达升高;②CRT发生膜转位,ATP和HMGB1向细胞外分泌,p-eIF2α蛋白表达升高;③ 与单独用MIT处理组相比,MIT处理并下调RP11-495P10.1后的细胞,RP11-495P10.1的表达不受任何影响,而细胞凋亡更加明显,CRT的膜转位量、ATP、HMGB1的分泌量和p-eIF2α蛋白的表达均显著升高.结论 RP11-495P10.1在MIT诱导下影响肝癌细胞DAMPs的释放,进而促进免疫原性细胞死亡的发生,此研究将为肝癌的治疗提供新的免疫治疗手段.
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