【摘 要】
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为了解新疆两个规模化牛场温氏支原体(附红细胞体)的流行情况,本研究采集了不同年龄段牛(＜6月龄犊牛、后备母牛、成年母牛、育肥牛)的血液样品共152份,利用PCR方法扩增血液样品中的温氏支原体16S rRNA部分基因序列,两个牛场各选取3份PCR产物测序后分析其与温氏支原体参考株(AF016546)的同源性并统计温氏支原体的感染情况;采用Mega7.0软件对扩增出的16S rRNA部分基因与Genbank数据库里登录的温氏支原体分离株相应基因序列构建进化树分析其遗传进化关系;利用相关性检验分析牛特征性临床症
【机 构】
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新疆生产建设兵团第二师畜牧兽医工作站,新疆铁门关841023;塔里木畜牧科技兵团重点实验室,新疆阿拉尔843300;新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站,新疆乌鲁木齐830021;黄埔海关技术中心,广东东
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为了解新疆两个规模化牛场温氏支原体(附红细胞体)的流行情况,本研究采集了不同年龄段牛(＜6月龄犊牛、后备母牛、成年母牛、育肥牛)的血液样品共152份,利用PCR方法扩增血液样品中的温氏支原体16S rRNA部分基因序列,两个牛场各选取3份PCR产物测序后分析其与温氏支原体参考株(AF016546)的同源性并统计温氏支原体的感染情况;采用Mega7.0软件对扩增出的16S rRNA部分基因与Genbank数据库里登录的温氏支原体分离株相应基因序列构建进化树分析其遗传进化关系;利用相关性检验分析牛特征性临床症状与温氏支原体阳性检出率的相关性.结果 显示,152份血液样品中有59份样品扩增出约750 bp的目的 基因片段.测序分析结果显示本研究获得的16S rRNA基因序列与温氏支原体分离株FJ375309.1、MG948625.1的16S rRNA基因序列同源性达100％,与温氏支原体参考株(AF016546)同源性达99.16％.结果 表明,59份血液样品检测到温氏支原体,阳性检出率为38.82％(59/152),A场阳性检出率为65.0％(52/80),B场阳性检出率为9.7％ (7/72).不同年龄段牛的阳性检出率分别为:成年母牛(13.82％,21/152)＞后备母牛(13.15％,20/152)＞育肥牛(7.89％,12/152)＞犊牛(3.95％,6/152).系统发育树显示,本研究所测的16S rRNA基因序列与温氏支原体中国丰都分离株(FJ375309.1)亲缘关系最近.相关性检测结果显示,温氏支原体阳性检出者与其临床症状(主要是消瘦、贫血)呈弱相关性.阳性检出率较高的成年母牛和后备母牛为温氏支原体在规模化养殖场的持续流行提供了传染源.本研究证实了温氏支原体在新疆规模化牛场的流行.
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