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计算机辅助高效液相色谱（HPLC）分离条件优化可以低成本、快速地得到优化的分离条，因而已较为广泛地用于复杂样品的分离分析。基于移动重叠分离图方法，又发展了一种新型的多台阶梯度分离条件的优化方法——可调移动重叠分离图法。该方法通过预测不同流动相条件下各组分的保留时间、峰宽和分离度，绘制出对于样品中各组分的重叠分离区域图。在对当前台阶流动相组成进行优化的同时，考虑其对后面一到两个台阶上流出组分保留的影响，实时地重新绘制对于后面台阶上流出组分的重叠分离区域图。通过观察当前台阶流动相条件对当前台阶和后面台阶上流出