【摘 要】
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目的:建立柱前衍生化高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定天麻提取物中18种氨基酸的含量.方法:供试品在6 mol·L-1盐酸中110℃水解24 h,与异硫
【机 构】
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北京协和制药二厂,北京102600;北京协和药厂,北京102600
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目的:建立柱前衍生化高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定天麻提取物中18种氨基酸的含量.方法:供试品在6 mol·L-1盐酸中110℃水解24 h,与异硫氰酸苯酯进行衍生化反应.采用Waters Symmetry(R)C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为0.1 mol·L-1乙酸钠缓冲液(pH 6.5)-乙腈(97∶3),流动相B为乙腈-水(80∶ 20),以1.0 mL· min-1的流速进行梯度洗脱,检测波长为254 nm,柱温为35℃.结果:18种氨基酸衍生物能够完全分离(分离度＞2.0),在1.0～10.0μg·mL-1浓度范围内线性良好(r ＞0.999),且供试品溶液在16 h内稳定,平均回收率(n=6)在92.5％ ～ 103.8％之间,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均＜3.0％.经检测,3批天麻提取物中氨基酸总含量分别为4.51％,4.20％和4.18％.结论:经方法学验证,本法可适用于天麻提取物中18种氨基酸含量的测定.
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