【摘 要】
：
为构建表达绿色荧光蛋白(GFP)作为示踪标记的重组禽肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)并鉴定其遗传稳定性,本研究通过重叠延伸PCR构建5’端含有T7启动子和核糖体结合位点(RBS),3’
【机 构】
：
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室,福建农林大学动物科技学院
【基金项目】
：
兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务费(SKLVBP201422)
论文部分内容阅读
为构建表达绿色荧光蛋白(GFP)作为示踪标记的重组禽肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)并鉴定其遗传稳定性,本研究通过重叠延伸PCR构建5’端含有T7启动子和核糖体结合位点(RBS),3’端含有T7终止子序列的增强型GFP(e GFP)表达盒,并将e GFP表达盒插入p MD18-T载体中构建p MD-e GFP原核表达重组质粒,将其转化于S.enteritidis。结果显示e GFP能够在S.enteritidis中持续表达。进一步将S.enteritidis hil A基因两端的51 bp序列分别添加到p MD-e GFP中e GFP表达盒的两端,构建p MD-He GFP重组质粒。荧光显微镜观察和流式细胞仪分析与p MD-e GFP相比,p MD-He GFP转化S.enteritidis后,其e GFP的荧光强度提高约30倍。通过在无抗生素选择压力下连续传20代次,重组S.enteritidis中e GFP仍然能够稳定表达。本研究结果为进一步研究S.enteritidis在动物体内的分布和定植规律等提供了一种具有荧光示踪标记的目标菌,并为其他细菌的同类研究提供了借鉴。
其他文献
干旱和半干旱地区水分不足是影响作物产量的主要因素，但同时，这一地区也存在灌溉水的利用效率低和灌溉水的浪费现象。在农业用水日趋紧张的情况下，通过各种水肥管理措施提高干旱
科研是大学的职能之一,民办高校是大学,理所当然也应该承担这一任务。但是通过调查发现,我国民办高校的科研现状总体并不理想,与公办高校有较大差距。适逢《国家中长期发展规
大连2003年提出"大大连"的发展战略,规划了"一个中心,四个基地"和"一岛十区"的全域化发展思路,并制定了很多相关政策措施,促进全域城市化的实现。随着"银发时代"的到来,养老
先天性小眼球是一种先天性发育异常的眼科疾病,并伴有其它眼部畸形,该病遗传方式多样,可为常染色体显性遗传、常染色体隐性遗传及X连锁隐性遗传,本文对临床上的一例先天性小
着重研究当下我国高校新闻专业教育课程设置体系。自改革开放以来，中国高校的新闻专业教育无论是规模和内容还是理论都有了长足的发展，但是，随着社会的进一步发展，中国的新闻专业
2009年起,我国开始招收以应届本科毕业生为主的全日制硕士专业学位范围。全日制教育硕士的课程在课程理念、课程目标、课程内容、课程实施等方面都发生了与教育学硕士和非全
中国高校思想政治教育与科学学科、其他人文学科的最显著差别在于其跨学科性.有趣的是,英国高校思想政治教育与中国高校思想政治教育的最显著差别也在于其跨学科性.基于哲学
凹凸棒石黏土是一种重要的稀缺性非金属矿产资源，在农牧业、建材、石油、冶金、食品等领域中有着广泛应用。世界上只有美国、澳大利亚、中国等少数几个国家拥有这一资源。甘肃
日本黑崎窑业公司常务董事成濑庸一先生在1980年4月随日本窑业协会代表团访津期间与我市有关技术人员进行了广泛的学术交流,向我们介绍了日本耐火材料的进展和今后发展方向。
高校教师作为高等教育的实施者对整个高等教育过程起着十分重要的作用,他们的人生信念,生活状态直接影响着高等教育的过程。新教师是一群年龄较轻工作热情极高的特殊群体。他