【摘 要】
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目的:探讨U2AF1基因突变对人骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系SKM-1细胞炎症因子表达的影响,并观察上述作用是否通过FOXO3a-Bim信号通路介导.方法:构建U2AF1野生型以及U2AF1蛋白序列第34位丝氨酸突变为苯丙氨酸的真核表达质粒(S34F),慢病毒包装并转染SKM-1细胞,通过慢病毒技术上调细胞中FOXO3a的表达并验证其转染效率.采用CCK-8法检测各组细胞的增殖;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;qRT-PCR法检测促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α,以及抑炎因子IL-4的表达
【机 构】
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上海交通大学附属第六人民医院血液科,上海200233
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目的:探讨U2AF1基因突变对人骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系SKM-1细胞炎症因子表达的影响,并观察上述作用是否通过FOXO3a-Bim信号通路介导.方法:构建U2AF1野生型以及U2AF1蛋白序列第34位丝氨酸突变为苯丙氨酸的真核表达质粒(S34F),慢病毒包装并转染SKM-1细胞,通过慢病毒技术上调细胞中FOXO3a的表达并验证其转染效率.采用CCK-8法检测各组细胞的增殖;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;qRT-PCR法检测促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α,以及抑炎因子IL-4的表达;Western blot法检测FOXO3a、Bim、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平.结果:与对照组相比,S34F组细胞凋亡率及促炎因子IL-1β和TNF-α转录水平显著增加(P＜0.05),细胞周期阻滞在G2期,细胞增殖及抑炎因子IL-.4的转录水平显著降低;FOXO3a、Bim和Bax蛋白表达水平显著增加(P＜0.05);Bcl-2表达水平显著降低(P＜0.05).FOXO3a基因的上调使U2AF1基因S34F突变的SKM-1细胞增殖受到明显抑制、细胞凋亡率增加,细胞周期阻滞在S期和G2期;促炎因子IL-1β和TNF-α转录水平显著降低(P＜0.05),抑炎因子IL-4转录水平无明显变化(P＞0.05).结论:U2AF1基因S34F突变可诱导SKM-1细胞炎症反应表型,并通过FOXO3a-Bim信号通路在MDS中发挥作用.
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目的:研究RITA对TP53突变的人套细胞淋巴瘤细胞株Mino的作用及其调控机制.方法:体外培养Mino细胞,不同浓度(0-16 μmol/L) RITA作用于Mino细胞24、48、72 h后,采用CCK-8法检测RITA对Mino细胞的增殖抑制作用;0-8 μmol/L浓度RITA作用于Mino细胞48 h,采用Annexin V/PI流式细胞术检测RITA对Mino细胞的凋亡诱导作用,采用Western blot法检测蛋白BCL-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、PARP、
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目的:探讨不同剂量地西他滨治疗高危骨髓增生异常综合征(MDS)患者的临床疗效及安全性.方法:选取高危MDS患者30例,均使用去甲基化药物地西他滨治疗.根据患者使用地西他滨剂量不同,分为10 d[6 mg/(m2·d)×10 d,15例]和5d方案组[15 mg/(m2·d)×5d,15例],比较两组患者地西他滨的疗效及不良反应.结果:随访至2020年5月,10 d方案组获完全缓解10例,部分缓解3例,疾病进展2例;完全缓解率为66.67％,总反应率为86.67％,死亡4例,其中1例死于心衰,2例死于呼吸衰
目的:观察由连接蛋白43 (Cx43)组成的细胞间隙连接通讯(GJIC)及其介导的信号对多发性骨髓瘤(MM)细胞生物学行为的影响,并探讨其可能机制.方法:分离、培养MM患者、正常人骨髓间充质干细胞(MSC);采用RT-PCR及蛋白印迹检测不同来源MSC中Cx43的表达,流式细胞术分选MM侧群细胞(SP),直接共培养后观察不同来源MSC对SP细胞周期、Cx43表达、体外集落形成、干细胞相关基因表达、细胞因子分泌和耐药的变化以及加入GJIC抑制剂18α甘草次酸(18 α-GA)的影响.结果:MM患者及正常人骨
目的:探讨青蒿琥酯和亚砷酸以及两药联合处理对人多发性骨髓瘤细胞增殖及凋亡的影响及其作用机制.方法:培养人多发性骨髓瘤细胞系RPMI 8226细胞,并分别采用0、1、2、4、8 nmol/L的亚砷酸和0、40、80、160、320μmol/L的青蒿琥酯处理细胞.用CCK-8法检测药物对细胞生长的抑制作用,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用qPCR检测细胞增殖、凋亡相关因子mRNA表达,用蛋白印迹法检测细胞增殖、凋亡相关因子及PI3K/AKT通路蛋白的表达.结果:CCK-8法检测到在亚砷酸和青蒿琥酯的作用下多发性
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目的:探讨不同水平血清游离轻链(sFLC)和单克隆免疫球蛋白(MP)对多发性骨髓瘤(MM)复发患者疗效及预后的影响,以及轻链逃逸(LCE)的临床意义.方法:回顾性分析71例MM患者复发后sFLC/MP水平与临床特征及转归的关系,根据复发后sFLC/MP水平将患者分为MO组、MLC组及LCE组,比较各组患者的临床指标、疗效、复发后生存期(SAR)及总生存期(OS),并采用配对样本t检验对LCE组内复发前后相关指标进行分析.结果:各组患者在ISS分期、复发后sFLC/MP水平、Hb、PLT、ALB及骨髓浆细胞
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目的:评价BUCY(白消安+环磷酰胺)预处理方案应用于多发性骨髓瘤患者自体造血干细胞移植的安全性和疗效性.方法:回顾性分析2012年5月至2015年6月苏州大学附属第—人民医院血液内科72例多发性骨髓瘤移植患者的临床资料,其中36例患者接受BUCY预处理方案,36例接受HDM预处理方案,比较两组移植期间并发症、移植后造血重建和疗效.结果:两组患者基本资料,包括性别、年龄、分型分期、诱导方案、动员方案及预处理方案加用硼替佐米的比例差异均无统计学意义.BUCY组和HDM组中性粒细胞植入时间分别为10 (8-1