【摘 要】
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目的研究阿霉素诱导白血病细胞凋亡的剂量及时间关系,探索其相关的分子机制.方法分别以0 1、0.2、0.5、1.0 mg/L的阿霉素处理人类Jurkat白血病细胞6、12、24、48 h.其中一份
【机 构】
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东南大学附属中大医院儿科,南京,210009
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目的研究阿霉素诱导白血病细胞凋亡的剂量及时间关系,探索其相关的分子机制.方法分别以0 1、0.2、0.5、1.0 mg/L的阿霉素处理人类Jurkat白血病细胞6、12、24、48 h.其中一份样本在加入0 2 mg/L阿霉素前用zVAD-fmk(苄氧羰-缬氨酰-丙氨酰-天冬氨酰-氟甲基酮)预处理.应用AnV/PI双染细胞,在流式细胞仪上分析AnV/PI双阳性的凋亡细胞.采用WesternBlot技术检测FasL和FADD(Fas相关死亡域)的表达.结果6h时所有剂量的阿霉素诱导的凋亡细胞无显著差异(P>0.05),在12 h,只有1.0 mg/L诱导细胞明显凋亡.当细胞与0 2和0 5 mg/L的阿霉素共同培养24 h或36 h,观察到调亡细胞显著增加(P<0 001).在zVAD-fmk存在的情况下,当细胞与阿霉素一同培养时,由阿霉素诱导的细胞凋亡完全受到抑制(P<0.001).随着阿霉素作用时间增加,FasL和FADD表达水平相应增加.结论在阿霉素诱导的白血病细胞凋亡中,阿霉素以剂量和时间依赖方式诱导细胞凋亡;上调FasL可能启动FasL信号通路的激话,而caspase是最终的执行者.
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