【摘 要】
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目的 探讨miR-182-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及可能机制.方法 将前列腺癌PC-3细胞分为四组,分为空白组(未进行转染)、miR-182-5p阴性对照组(转染无义序列)、miR-182-5p模拟物组(转染miR-182-5p模拟物)、miR-182-5p抑制物组(转染miR-182-5p抑制物),采用实时定量PCR验证转染效率,CCK-8法检测各组PC-3细胞的增殖能力,Western blot检测各组PC-3细胞SMAD4蛋白表达,应用生物信息学网站分析SMAD4是否为miR-182-5
【机 构】
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本溪市中心医院泌尿外科,辽宁本溪117000;辽宁省重要技术创新与研发基地建设工程中心,辽宁沈阳110168
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目的 探讨miR-182-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及可能机制.方法 将前列腺癌PC-3细胞分为四组,分为空白组(未进行转染)、miR-182-5p阴性对照组(转染无义序列)、miR-182-5p模拟物组(转染miR-182-5p模拟物)、miR-182-5p抑制物组(转染miR-182-5p抑制物),采用实时定量PCR验证转染效率,CCK-8法检测各组PC-3细胞的增殖能力,Western blot检测各组PC-3细胞SMAD4蛋白表达,应用生物信息学网站分析SMAD4是否为miR-182-5p的靶基因,应用双荧光素酶报告基因实验验证.结果 CCK-8实验结果显示,miR-182-5p过表达后,PC-3细胞增殖能力增强,SMAD4蛋白表达下降;抑制miR-182-5p表达后,PC-3细胞增殖能力降低,SMAD4蛋白表达升高.生物信息学分析结果显示SMAD4基因3UTR区存在miR-182-5p的结合位点,双荧光素酶实验证实了SMAD4为miR-182-5p的靶基因.结论 miR-182-5p可能通过靶向SMAD4调控前列腺癌PC-3细胞的增殖.
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