【摘 要】
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目的构建重组EGFR噬菌体疫苗并且观察其抗肿瘤效果.方法将鸡源EGFR膜外部分的5个基因片段插入到T7噬菌体展示系统中,EGFR蛋白以融合蛋白的形式展示在噬菌体的外壳蛋白10B上,
【机 构】
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上海市肺科医院肺癌免疫研究室,200433;
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目的构建重组EGFR噬菌体疫苗并且观察其抗肿瘤效果.方法将鸡源EGFR膜外部分的5个基因片段插入到T7噬菌体展示系统中,EGFR蛋白以融合蛋白的形式展示在噬菌体的外壳蛋白10B上,从而构建成噬菌体疫苗.Weste blot方法检测噬菌体壳蛋白上是否有EGFR表达.利用ELISA方法检测免疫小鼠血清中抗EGFR抗体.分离免疫小鼠脾细胞,检测淋巴细胞对靶细胞A431的细胞毒作用.C57小鼠经过4次免疫,接种Lewis肺癌,记录肿瘤的生长情况,评价疫苗的抗肿瘤效果.结果本实验成功构建5种鸡源EGFR噬菌体疫苗.Weste blot显示噬菌体壳蛋白上有EGFR表达.免疫后的小鼠血清中检测到抗EGFR抗体.体外分离脾细胞证明免疫后的小鼠脾细胞对EGFR受体高表达的A431细胞具有杀伤作用.靶细胞和效应细胞的比例在1:10时,最大杀伤率可达(45.74±7.21)%(P＜0.001).肿瘤生长曲线显示免疫后的C57小鼠Lewis肺癌生长受到明显的抑制.结论利用噬菌体展示技术构建的噬菌体疫苗是一种有效的抗肿瘤方法.
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