茂原链轮丝菌转谷氨酰胺酶基因在大肠杆菌中高效表达

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利用PCR方法从茂原链轮丝菌(Streptoverticillium mobaraense)基因组DNA扩增出微生物转谷氨酰胺酶(Microbial Transglutaminase,MTG)的基因片段,并构建表达质粒pET-MTG.后者在大肠杆菌(Rosetta DE3)中得到高效表达,但表达的MTG存在于包涵体中.经洗涤、变性和复性,并以强阳离子交换层析纯化,获得了SDS-PAGE纯的MTG,并具有与天然酶几乎相同的比活性.此项工作为工业化生产MTG打下了基础.
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