【摘 要】
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目的 构建人miR-26b慢病毒表达载体,并检测其在人前体脂肪细胞中过表达效果.方法 以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR扩增包含miR-26b所在区域上下游100 bp左右的基因组DNA,克
【机 构】
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南京医科大学公共卫生学院,江苏省,210029;中国人民解放军第82医院检验科;南京医科大学儿科研究所;南京医科大学第一附属医院;南京医科大学附属南京妇幼保健院
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目的 构建人miR-26b慢病毒表达载体,并检测其在人前体脂肪细胞中过表达效果.方法 以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR扩增包含miR-26b所在区域上下游100 bp左右的基因组DNA,克隆慢病毒表达载体,进一步包装成慢病毒并感染人脂肪细胞,荧光定量PCR检测miR-26b表达.结果 成功构建miR-26b慢病毒载体,病毒感染效率为75％左右,miR-26b过表达效率达2倍以上.结论 成功构建了miR26b慢病毒表达载体,可用于研究miR-26b在人脂肪细胞中的分子机制.
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