【摘 要】
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目的为进一步研究胰蛋白酶基因与抗药性的关系.方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的胰蛋白酶(trypsin)基因编码区.T/A克隆测序鉴定
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目的为进一步研究胰蛋白酶基因与抗药性的关系.方法采用PCR方法,以淡色库蚊抗性品系cDNA文库为模板,扩增出抗药性品系高表达的胰蛋白酶(trypsin)基因编码区.T/A克隆测序鉴定后,亚克隆到昆虫细胞表达载体pIE1-3,构建重组昆虫细胞表达载体pIE1-3/try.经酶切和PCR鉴定后,与带有筛选标记的pIE1-neo质粒共转染蚊虫细胞C6/36,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞.用RT-PCR、Western blotting鉴定胰蛋白酶基因的转录表达.结果酶切和PCR鉴定表明,成功构建昆虫细
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