生物素化FOXM1真核表达体系的构建及鉴定

来源 :生命科学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ZAQWSX12344321

【摘要】

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建立基于生物素AP-tag标签的FOXM1真核表达载体,利用生物素与链霉亲和素的高特异性、高亲和力的结合性质对FOXM1蛋白进行纯化,为后续鉴定其互作分子的研究奠定基础。分别构建

【作者】

：

邹红春谭桂湘谭拥军

【机构】

：

湖南大学生物学院

【出处】

：

生命科学研究

【发表日期】

：

2016年1期

【关键词】

：

生物素化FOXM1 BirA生物素连接酶 HEK 293T细胞亲和纯化蛋白印迹 biotinylated FOXM1 BirA biotin ligase

【基金项目】

：

国家自然科学基金中港合作研究NSFC-RGC项目（香港大学）

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建立基于生物素AP-tag标签的FOXM1真核表达载体,利用生物素与链霉亲和素的高特异性、高亲和力的结合性质对FOXM1蛋白进行纯化,为后续鉴定其互作分子的研究奠定基础。分别构建真核表达载体pc DNA3.1-AP-FOXM1和大肠杆菌生物素连接酶Bir A真核表达载体pcDNA3.1-Bir A,将pcDNA3.1-AP-FOXM1和pcDNA3.1-BirA共转染人胚肾293T（HEK293T）细胞,用银染及Western印迹检测细胞裂解液,确定相关蛋白表达;用链霉亲和素琼脂糖珠纯化生物素标记的FOX

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