RNA干扰技术抑制锌指蛋白139对胃癌原位移植裸鼠血清的影响

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhou1022
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目的 观察抑制人胃癌细胞株SGC7901中锌指蛋白139(ZNF139)表达对胃癌原位移植裸鼠血清蛋白质的影响,探讨ZNF139参与胃癌进展的机制.方法 构建针对ZNF139的小干扰RNA (siRNA)重组质粒并导入胃癌细胞SGC7901;G418筛选出稳定转染细胞克隆并经皮下瘤鼠间传代6代后应用OB生物胶粘贴法进行原位移植;应用荧光双向差异凝胶电泳(2D-DIGE)及液质联用(LC-MS)技术鉴定差异蛋白点,并应用Western blot法验证鉴定出的部分蛋白质.结果 胃癌原位移植裸鼠成瘤率100%(15/15).siRNA重组质粒抑制了ZNF139在SGC7901中的表达,siRNA-ZNF139组胃癌原位移植裸鼠瘤体生长明显减慢.在转染组和对照组原位移植裸鼠血清中鉴定出5种差异蛋白质,抑制ZNF139后表达下调的为载脂蛋白E(APOE)、激肽原1(KNG1),表达上调的有α2-巨球蛋白(α2-MG)、线粒体转录终止因子(mTERF)、DIXDC1.Western blot法对KNG1、mTERF、APOE的表达进行了验证,结果与蛋白质组学一致.结论 ZNF139可能通过促进血清APOE、KNG1及抑制mTERF的表达来参与胃癌进展。

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