【摘 要】
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对番茄基因组DNA的SRAP-PCR体系中Mg2+、dNTPs和引物浓度进行了优化,结果表明反应体系中适宜浓度为Mg2+1.5~3.0 mmol.L-1,dNTPs 0.05~0.20 mmol.L-1,引物0.25μmol.L-1;模板D
【机 构】
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南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室／园艺学院,江苏省农业科学院蔬菜研究所,上海市蔬菜科学技术推广站
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对番茄基因组DNA的SRAP-PCR体系中Mg2+、dNTPs和引物浓度进行了优化,结果表明反应体系中适宜浓度为Mg2+1.5~3.0 mmol.L-1,dNTPs 0.05~0.20 mmol.L-1,引物0.25μmol.L-1;模板DNA为10~20 ng(10μL反应体系)。运用优化的体系,筛选获得3个合作906与其父母本多态性标记引物组合。利用15个引物组合对11个番茄主要品种以及1个近缘野生种进行种质鉴定的SRAP标记分析,10个多态性的引物组合共检测到55个多态性位点,平均每个引物可鉴别3.7个品种,双引物组合m e8/em8-1与m e6-1/em14-1可以区分所有供试材料。应用NTSYS-pc软件进行聚类分析(UPGMA),园艺性状相似的品种在较近的遗传距离聚类,表明SRAP可有效用于番茄品种资源鉴定与遗传多样性分析。
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