【摘 要】
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猪瘟（classical swine fever, CSF）是危害猪健康的重要传染病之一，具有急性、热性和高度接触性等特性，给世界养猪业造成了巨大的经济损失。PCR-ELISA检测方法是在PCR和ELISA基础上创新的一种新技术，其灵敏性和准确性都高于单纯的PCR检测和ELISA检测。根据GenBank中猪瘟石门株序列，设计特异性引物，分别在5’端标记生物素和地高辛，经过PCR扩增后，加入到包被有
【基金项目】
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河南省重点研发与推广专项（科技攻关）（202102110094,212102310335）； 新乡市科技攻关项目（GG2019018,GG2020018）；
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猪瘟（classical swine fever, CSF）是危害猪健康的重要传染病之一，具有急性、热性和高度接触性等特性，给世界养猪业造成了巨大的经济损失。PCR-ELISA检测方法是在PCR和ELISA基础上创新的一种新技术，其灵敏性和准确性都高于单纯的PCR检测和ELISA检测。根据GenBank中猪瘟石门株序列，设计特异性引物，分别在5’端标记生物素和地高辛，经过PCR扩增后，加入到包被有链霉亲和素的ELISA反应板上，然后通过DIG-HRP抗体进行显色反应，建立PCR-ELISA检测方法。结果表明：PCR-ELISA最低检测到1.81×10~4拷贝/μL,普通PCR最低检测到1.81×10~6拷贝/μL,因此PCR-ELISA灵敏性比普通PCR高约100倍；对27份未知样品进行检测，普通PCR检测出阳性样品15份，阳性率为55.5%,PCR-ELISA检出20份阳性样品，阴性7份，阳性率为74%,阳性检出率增加18.5%;用建立的Real-Time PCR进行验证，检测结果与PCR-ELISA一致，两者的符合度为100%;然后用PK15细胞对普通PCR未检测出的阳性样品进行病毒分离培养，通过间接免疫荧光（IFA）及普通PCR检测，结果显示该5份样品均为阳性。说明本研究所建立的PCR-ELISA方法具有灵敏、特异、准确、快速、安全等优势，可应用于CSFV的快速诊断，为CSFV的流行病学监测提供有力保障。
其他文献
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本文阐述了EGNOS的基本情况,重点从EGNOS电离层格网改正数的覆盖范围方面对其生命安全服务性能进行了分析,讨论了EGNOS未来与发展。研究结果表明,EGNOS通过格网算法对监测站覆盖区域之外的电离层网格点数据进行了外推,具有0≤GIVEI≤9的电离层格网分布基本与其监测站布局一致,其监测站覆盖区域之外的电离层格网的GIVEI均为13以上。此外,EGNOS生命安全服务APV-I和LPV-200的
＜正＞党的十八大以来，以习近平同志为核心的党中央高度重视安全生产工作，习近平总书记多次作出重要指示批示，提出一系列关于安全生产的新理念、新举措、新要求。习近平总书记关于安全生产的重要论述，系统回答了如何认识安全生产工作、如何做好安全生产工作等重大理论和实践问题，是安全生产经验教训的科学总结，是做好新时代安全生产工作的根本遵循和行动指南。2021年8月13日，
背景:骨肉瘤是最常见的原发性恶性骨肿瘤,多生长于长骨干骺端,在青少年和儿童中较为常见。20世纪70年代以前只能通过截肢手术的方式治疗,术后5年生存率低。随着现代医学的进步和发展,现今临床通常采取手术切除癌组织以及多种药物联合化疗的方式进行治疗;然而,部分患者因无法彻底切除肿瘤组织或术后复发,预后不理想等原因放弃治疗。因此,骨肉瘤的临床治疗仍然存在局限性和挑战。对于骨肉瘤的化疗,绝大多数方案以阿霉素
畜牧经济发展中，养猪业起到了重要的支撑作用，猪群健康与否，是影响畜牧经济可持续增长的重要因素。当前，受到诸多因素的影响，生猪咳喘现象增多，影响猪的健康生长，严重的会致死，进而造成巨大经济损失，因此做好猪咳喘的治疗工作尤为重要。基于此，本文着重对猪咳喘的中兽医治疗方法展开了深入探析。
统筹推进传统基础设施和新型基础设施建设是国务院“十四五”规划的重点建设项目,是我国政府打造现代化基础设施体系的重要举措。政府想要在保证公平公正的基础上进行基础设施建设,代表着采购公平性、竞争性和规范性的招投标活动是必不可少的环节。但在实际操作中,由于竞标主体间串通投标和陪标等行为的屡禁不止,导致了政府监管的困难和信任的危机。对政府采购串标陪标问题展开专项审计,是国家预防、揭示和抵御舞弊,保护和挽回
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非洲猪瘟（ASF）是由属于Asfaviridae家族的非洲猪瘟病毒（ASFV）引起的。本文主要研究间接ELISA（酶联免疫吸附测定）检测ASFV（非洲猪瘟病毒）P22蛋白原核表达方法建立，并得出了一定的实验成果，本研究中开发的基于重组p22?TM/p30的间接ELISA显示出高重复性，具有可接受的诊断敏感性和特异性。值得注意的是，这种间接ELISA可以检测针对毒性基因Ⅱ型ASFV的抗体，而其他可用
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