【摘 要】
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目的 观察外周5-羟色胺(5-HT)诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NET)的生成对脓毒症小鼠肺损伤的影响.方法 选择6～8周龄野生型(WT型)和Tph1基因敲除(Tph1Ko) C57小鼠,按随机数字表法分为WT小鼠假手术组、WT小鼠脓毒症组和Tph1KO小鼠假手术组、Tph1KO小鼠脓毒症组.假手术组小鼠接受假手术处理(仅打开腹腔翻动盲肠但不结扎和穿刺,然后关腹);脓毒症组小鼠接受盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型.术后12h处死小鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF
【机 构】
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江苏大学,江苏镇江212001;江苏大学附属医院重症医学科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院放疗科,江苏镇江212001;江苏大学附属医院烧伤整形科,江苏镇江212001
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目的 观察外周5-羟色胺(5-HT)诱导中性粒细胞胞外诱捕网(NET)的生成对脓毒症小鼠肺损伤的影响.方法 选择6～8周龄野生型(WT型)和Tph1基因敲除(Tph1Ko) C57小鼠,按随机数字表法分为WT小鼠假手术组、WT小鼠脓毒症组和Tph1KO小鼠假手术组、Tph1KO小鼠脓毒症组.假手术组小鼠接受假手术处理(仅打开腹腔翻动盲肠但不结扎和穿刺,然后关腹);脓毒症组小鼠接受盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型.术后12h处死小鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量;同时收集小鼠肺组织标本,光镜下观察肺组织病理学改变,采用免疫荧光显微镜观察小鼠肺组织中NET生成情况.结果 病理学结果提示:假手术组小鼠肺组织结构完好,未见渗出;而脓毒症组小鼠肺泡结构破坏,肺泡腔内可见明显渗出,肺泡壁增厚并伴有大量炎性细胞浸润,且WT小鼠脓毒症组肺损伤程度较Tph1Ko小鼠脓毒症组严重.ELISA结果显示:不同品系假手术组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量比较差异无统计学意义;而脓毒症组小鼠BALF中TNF-α和IL-6含量均较假手术组明显升高(WT小鼠:TNF-α(μg/L)为158.20±28.46比14.00±3.28,IL-6(μg/L)为304.98±21.78比57.70± 12.30;Tph1Ko小鼠:TNF-α(μg/L)为85.88±20.13比14.95±1.53,IL-6(μg/L)为169.50±45.61比55.05±12.68,均P＜0.01],且WT小鼠脓毒症组上述指标水平均明显高于Tph1Ko小鼠脓毒症组[TNF-α(μg/L):158.20±28.46比85.88±20.13,IL-6(μg/L):304.98 ±21.78比169.50±45.61,均P＜0.01].免疫荧光染色显示:假手术组小鼠肺脏中均检测到极少量的NET生成;而脓毒症组小鼠肺组织中均检测到大量的NET生成,明显高于假手术组[WT小鼠:(34.75±7.27)％比(1.75±0.96)％,Tph1K0小鼠:(14.25±5.74)％比(2.50±1.29)％,均P＜0.01],且WT小鼠脓毒症组小鼠肺脏组织中NET生成量较Tph1Ko小鼠脓毒症组明显增多[(34.75±7.27)％比(14.25±5.74)％,P＜0.01].结论 脓毒症时,小鼠肺组织中炎性因子产生增加导致肺损伤,其机制与外周5-HT介导的肺组织中NET的生成增加有关;抑制外周血中5-HT的产生可有效减少肺组织中NET生成,从而减轻肺损伤.
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