评价自噬在右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应中的作用。
方法体外培养的小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞，细胞常规接种于6孔板或96孔板，待融合度为60%时，采用随机数字表法分为4组(n＝20)：对照组(Con组)、LPS组、LPS＋右美托咪定组(LPS＋Dex组)和LPS＋右美托咪定＋自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(LPS＋Dex＋3-MA组)。Con组加入PBS培养12 h；LPS组加入终浓度为1 000 ng/ml的LPS孵育12 h；LPS＋Dex组先加入终浓度为1 000 ng/ml的LPS，随后立即加入终浓度为1 μmol/L的右美托咪定孵育12 h；LPS＋Dex＋3-MA组先加入终浓度为2 mmol/L的3-MA孵育1 h，再加入终浓度为1 000 ng/ml的LPS，随后立即加入终浓度为1 μmol/L右美托咪定孵育12 h。采用CCK-8法检测细胞活力，采用ELISA法测定上清液NO、TNF-α和IL-1β的浓度，采用Western blot法测定微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、LC3Ⅱ、泛素结合蛋白(P62)和Bcelin-1的表达水平，计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。
结果与Con组相比，LPS组巨噬细胞活力降低，TNF-α、IL-1β和NO的浓度升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高，P62和Beclin-1的表达上调(P<0.05)；与LPS组相比，LPS＋Dex组巨噬细胞活力升高，TNF-α、IL-1β和NO的浓度降低，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高，P62表达下调，Beclin-1表达上调(P<0.05)；与LPS＋Dex组相比，LPS＋Dex＋3-MA组巨噬细胞活力降低，TNF-α、IL-1β和NO的浓度升高，LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低，P62表达上调，Beclin-1表达下调(P<0.05)。
结论自噬增强参与了右美托咪定减轻LPS致小鼠巨噬细胞炎症反应。