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本研究首先建立了近交系五指山小型猪(WZSP )胎儿成纤维细胞系((FF),新生猪骨髓间充质细胞(MSCs)系和成年猪前脂肪细胞系(PreA )。采用组织块法建立胎儿((27日龄)成纤维细胞系;髓间充质细胞从新生猪后腿骨冲取骨髓,加人到Percoll分离液中离心,吸取中间界层面细胞,贴壁法培养骨髓间充质原代细胞,培养基为低糖DMEM。对间充质细胞向脂肪细胞进行诱导分化,油红O染色鉴定;前脂肪细胞从猪的皮下脂肪取样,用0.1﹪胶原酶消化法建立前脂肪细胞原代细胞,并对前脂肪细胞进行诱导分化为成熟的脂肪细胞,油红O染色鉴定。为了获得转基因细胞系,利用脂质体lipofectamine2000 (Invitrogene)介导的方法将质粒pEGFP-N1转染了胎儿成纤维细胞、骨髓间充质细胞和前脂肪细胞,经过800μg/mL G418筛选后均获得了阳性细胞株。