改良组织块法原代培养大鼠成釉器细胞及其鉴定

来源 :西安交通大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxyxwxx
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目的 建立改良组织块法体外培养成釉器细胞的方法,为成釉器细胞的体外培养提供新的实验方法.方法 剥离出生4d的SD大鼠下颌磨牙牙胚,胶原酶消化1h,胰酶再消化5min,种植组织块于培养皿中.细胞长出组织块后,细胞刮刮除成纤维样细胞,继续培养,观察形态并应用免疫细胞化学法及RT-PCR法鉴定细胞.结果 种植48h后即有细胞长出组织块,细胞主要为铺路石样的、边界整齐的上皮样细胞和梭形的成纤维样细胞.细胞刮刮除成纤维样细胞后,残留上皮样细胞和少量梭形细胞.角蛋白14免疫细胞化学检测显示,上皮样细胞染色阳性,梭形细胞染色阴性.RT-PCR结果显示,所培养的铺路石样上皮细胞釉原蛋白、成釉蛋白mRNA均有特异性表达.结论 酶消化组织块法可用于成釉器细胞体外培养,为成釉器细胞的体外培养提供了新的实验方法.
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