探讨阿司匹林(aspirin,ASP)对高脂血症诱导的足细胞内质网应激的影响及可能机制。
方法培养足细胞分为4组:对照组、ASP(100 μg/ml)组、ox-LDL(100 μg/ml)组和ASP+ox-LDL组,在6 h、12 h、24 h、48 h以实时定量PCR法检测蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-1ike endoplasmic reticulum kinase,PERK)、真核细胞起始因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α)、活化转录因子4(activating transcription factor-4,ATF4)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CAAT/enhancer binding protein homologous protein,CHOP)的表达;在24 h时以Western印迹法检测磷酸化(p)-PERK、p-eIF2α的表达;在12 h时以Western印迹法检测ATF4的表达。
结果在足细胞培养24 h时,ox-LDL组和ASP+ox-LDL组PERK、eIF2α的表达水平达高峰,在12 h时,该两组ATF4、CHOP的表达水平达高峰。在足细胞培养6 h、12 h、24 h、48 h时,与对照组比较,ox-LDL组PERK、eIF2α、ATF4、CHOP的表达水平明显较高(均P<0.05);与ox-LDL组比较,ASP+ox-LDL组上述各指标表达明显较低(均P<0.05)。在足细胞培养24 h时,与对照组比较,ox-LDL组p-PERK、p-eIF2α的表达水平明显较高(均P<0.05);与ox-LDL组比较,ASP+ox-LDL组p-PERK、p-eIF2α的表达水平明显较低(均P<0.05)。在足细胞分组培养12 h时,各组ATF4蛋白水平的表达与mRNA表达相似。ASP组与对照组间上述各项指标表达差异无统计学意义。
结论高脂血症可能通过诱导PERK和eIF2α的磷酸化、激活ATF4转录及诱导CHOP高表达,引起足细胞内质网应激,而阿司匹林可能部分阻断了PERK通路,进而可能对足细胞具有保护作用。