【摘 要】
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为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株非结构蛋白Nsp10,以克隆质粒pMD18-T-Nsp10/JL为模板,将Nsp10基因克隆至原核表达载体pET-32a,转化至大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达,对不同温度
【机 构】
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贵州省畜牧兽医研究所,贵州省贵阳市农业委员会,贵州大学动物科学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31072158）, 贵州省农业攻关项目[黔科合NY字（2009）3071], 贵州省农业科学院研究生科研创新基金项目[黔农科合（创新基金）2011019]
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为获得猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株非结构蛋白Nsp10,以克隆质粒pMD18-T-Nsp10/JL为模板,将Nsp10基因克隆至原核表达载体pET-32a,转化至大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达,对不同温度和IPTG浓度进行优化,以获得Nsp10蛋白表达的最佳条件,采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达情况,并通过Western blotting检测其免疫活性。结果表明,Nsp10基因成功克隆至pET-32a,有分子量约为43.4 kD的融合蛋白获得表达,重组蛋白于诱导4 h后达到高峰,IPTG浓度为
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