【摘 要】
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目的 观察低频电磁场(LFEMF)对三维环境中培养的人表皮干细胞(ESCs)增殖的影响，为LFEMF用于皮肤组织工程提供实验依据。方法 取人包皮来源的ESCs作为种子细胞，利用Ⅳ型胶原快速
【机 构】
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广东省人民医院（广东省医学科学院）老年医学研究所
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目的 观察低频电磁场(LFEMF)对三维环境中培养的人表皮干细胞(ESCs)增殖的影响，为LFEMF用于皮肤组织工程提供实验依据。方法 取人包皮来源的ESCs作为种子细胞，利用Ⅳ型胶原快速贴壁法体外分离纯化ESCs，并种植于胶原海绵和壳聚糖支架材料，外加LFEMF治疗仪（场强5 mT，频率分别为1 Hz、10 Hz和50 Hz）刺激ESCs(30 min/d)，用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测支架材料细胞毒性，通过肉眼、HE染色后DAPI荧光核染色后镜下观察及扫描电镜观察ESCs生长情况，并收集培养2，7，10,14 d ESCs的DAPI核荧光染色数据，用显微图像软件分析细胞增殖数目，比较各时间点细胞增殖的区别。结果 LFEMF促进ESCs增殖的作用在不同频率组间的差异和两种支架上培养的ESCs增殖情况的差异均有统计学意义(P＜0.01)，10 d后胶原海绵支架上细胞增殖较壳聚糖支架上的细胞明显(P＜0.05)，各频率组LFEMF刺激均能促进ESCs增殖，频率不同，促增殖的效应不一(P ＜0.05)。结论 胶原海绵可较好地作为体外培养ESCs的支架，在LFEMF干预下可实现ESCs体外三维环境中较快扩增，LFEMF在皮肤组织工程中具有较大应用潜力。
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