农杆菌介导番茄遗传转化的相关因素优化

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为建立一个番茄遗传转化的稳定系统,本研究以"中蔬四号"品种为试验材料,采用含pBI121质粒的根癌农杆菌EHA105介导的方法研究了番茄遗传转化的相关因素。结果表明,外植体预培养2 d,GUS染色效果最好,抗性芽诱导率最高为22.75%;在诱导和共培养基中都加入200~300μmol/L乙酰丁香酮时,GUS染色效果和抗性芽诱导率均优于其他组合;菌液OD600值为0.6时,外植体生长良好,GUS染色效果最佳,抗性芽诱导率最高为25.16%;最有利于抗性芽诱导的农杆菌侵染时间和共培养时间分别以5 min和2 d为宜。通过抗性植株的PCR检测,确定目的基因已整合到番茄基因组中,这为今后番茄的转化提供一些参考。
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