唑来膦酸预处理的巨噬细胞诱导γδT细胞体外扩增的实验研究

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探讨唑来膦酸预处理的巨噬细胞对γδT细胞体外扩增作用及扩增的γδT细胞体外抗肿瘤的效应。从健康人外周血分离单个核细胞(PBMC),与唑来膦酸预处理的自身巨噬细胞以10∶1的比例在含400 U/ml IL-2的培养基中共培养。在培养的第10天收集细胞计数;采用流式细胞术进行γδTCR表型分析,同时检测其CD107a、NKG2D、穿孔素和颗粒酶B的表达;用CCK-8试剂盒检测γδT细胞对K562细胞的体外杀伤效应。结果显示,PBMC和唑来膦酸预处理自身巨噬细胞共培养10 d时,γδT细胞扩增224.34±84.19倍,纯度达到73.55%±9.42%,CD107a、NKG2D、穿孔素和颗粒酶B表达分别为55.90%±8.62%、78.18%±7.56%、72.65%±6.54%、59.82%±7.26%,均显著高于对照组;γδT细胞对K562细胞的杀伤效应在效靶比为40∶1时达72.37%±5.18%。以上结果表明,唑来膦酸预处理的巨噬细胞能有效诱导γδT细胞体外扩增,扩增的γδT细胞具有较强的抗肿瘤活性。
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