【摘 要】
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[目的]棉花黄萎病是由土壤传播的植物维管束真菌病害,导致每年棉花产量和品质的严重损失.本研究通过鉴定抗病基因,研究抗病机制,为棉花多抗种质资源创新提供理论基础.[方法]
【机 构】
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石河子大学农学院,新疆石河子832000华中农业大学/作物遗传改良国家重点实验室,武汉430070;
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[目的]棉花黄萎病是由土壤传播的植物维管束真菌病害,导致每年棉花产量和品质的严重损失.本研究通过鉴定抗病基因,研究抗病机制,为棉花多抗种质资源创新提供理论基础.[方法]利用酵母单杂交(Yeast one hybrid)筛选到1个GhLac1上游的调节因子,并通过构建系统进化树、氨基酸序列多重比对、定量逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)、烟草瞬时转化、双荧光素酶检测系统、病毒诱导的基因沉默技术、棉花遗传转化技术等对该转录因子相关功能进行验证.[结果]Gh_D12G0544与拟南芥(Arabidopsis thaliana)中AtMYB43同源性最高,将其编码基因命名为GhMYB43.GhMYB43位于陆地棉Dt亚组第12号染色体上,编码1个含376个氨基酸的蛋白质,含有2个MYB结构域;RT-qPCR分析发现GhMYB43在茎中优势转录,受水杨酸和过氧化氢诱导上调表达,而受茉莉酸甲酯诱导下调表达,转录水平会受大丽轮枝菌(Verticilium dahliae)诱导;亚细胞定位结果显示,GhMYB43蛋白定位于细胞核中;双荧光素酶检测系统验证该基因具有转录激活活性;抗病性鉴定发现抑制GhMYB43转录会增强棉花植株对黄萎病菌的抗性;超表达GhMYB43增强了棉花对黄萎病菌的敏感性;木质素组织化学染色和含量测定结果表明,超表达GhMYB43转基因系的木质素含量明显低于对照材料.RT-qPCR分析表明,GhMYB43负调控木质素合成途径中关键酶基因的转录水平,并且负调控茉莉酸信号路径相关基因的转录.[结论]GhMYB43负调控木质素合成和茉莉酸信号.
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