论文部分内容阅读
摘要：本研究验证了分光光度法测定白酒中氰化物含量的国标方法，并对实验操作中的关键点作了探讨。结果表明，氰化物浓度在0-2.0mg/L范围内线性良好，检出限为0.02mg/L，回收率在90.00%-101.33%之间，RSD为1.2%。
关键词：白酒；氰化物；分光光度法
氰化物是剧毒物质，进入机体会使细胞色素氧化酶失活，导致人体缺氧窒息。白酒中的氰化物主要由植物原料中的氰甙类配糖体在制酒过程中经水解产生，GB2757-2012中规定其限量为8.0mg/L，饮用氰化物超标的白酒会严重危害饮酒者的生命健康。目前，GB5009.36-2016中规定了分光光度法、气相色谱法两种氰化物定量检测方法，对于基层实验室而言，前者设备成本较低、操作简便快速。因此，本研究对白酒中氰化物测定的分光光度法进行了验证，并探讨了实验环节中的关键点。
1. 材料与方法
1.1 材料、试剂及仪器
白酒（购自某超市）；氰化物标准溶液（GBW（E）080115，50μg/mL）。
氢氧化钠；酚酞指示剂；乙酸；异烟酸；吡唑啉酮；氯胺T；去离子水等。
721G可见分光光度计（上海仪电公司）；电热板；恒温水浴锅。
1.2 实验方法
1.2.1 标准系列配制
准确吸取1.0mL氰化物标准溶液，用氢氧化钠溶液（2g/L）定容至50mL，制得1μg/mL的标准中间液。分别吸取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mL上述中间液于10mL比色管中，加入氢氧化钠溶液至5mL，待处理。
1.2.2 白酒试样制备
准确吸取1.0mL酒样至50mL烧杯中，加5mL氢氧化钠溶液（2g/L），放置10min，用120℃电热板加热至约剩1mL转移至10mL比色管中，以氢氧化钠溶液（2g/L）多次洗涤烧杯后并入洗涤液至5mL。
1.2.3 试样溶液测定
于放置标准系列和酒样的比色管中滴入2滴酚酞指示剂，加入乙酸溶液（1+24）至红色褪去，再以氢氧化钠溶液（2g/L）调至近红色后，依次加入2mL磷酸盐缓冲溶液、0.2mL氯胺T溶液（10g/L），摇匀后放置3min，然后加入2mL异烟酸-吡唑啉酮溶液，用去离子水定容，振荡摇匀，最后于37℃下水浴40min后在波长638nm测定吸光度，以标准系列点所含氰化物质量为横坐标，对应的吸光度为纵坐标，制作标准曲线，并以此定量酒样中的氰化物含量。
2. 结果与讨论
2.1 线性关系及检出限
测定标准系列的吸光度值，绘制标准曲线，回归方程为y=0.2923x-0.0667，R2=0.9991。按照取样量为1.0mL，定容体积为10mL，做20次空白平行试验，测定并记录吸光度值，根据公式DL=3SD/b（b为标曲斜率）计算得本方法的檢出限为0.02mg/L。
2.2 加标回收率与精密度
在白酒试样（本底为0.33mg/L）中添加低（0.5mg/L）、中（1.0mg/L）、高（1.5mg/L）不同浓度水平的标准溶液，各浓度水平平行测定2次，考察加标回收率；将上述白酒试样平行测定6次，考察精密度，经计算得本方法的加标回收率在90.00%-101.33%之间，相对标准偏差RSD=1.2%。
2.3 实验室间比对试验
为验证本实验方法的有效性，确保出具的数据准确可靠，本实验室与河南华测检测技术有限公司实验室进行比对试验，某批次的古月牌清香型白酒两家实验室测得氰化物含量均为0.29mg/L，比对结果满意。
2.4 实验操作关键点探讨
分光光度法测定白酒中的氰化物需要将氰化物转化为氯化氰，而该过程必须在体系pH=7.0条件下进行，实验中需要两次调节pH，然而酸碱用量须少于0.8mL才能确保最后定容准确。分光光度法基于朗伯比尔定律来定量，若显色液浑浊对吸光度值影响很大，因此，酸碱调节过程要掌握好酸碱用量，以免超过定容体积导致实验失败。此外，对于浑浊或有色酒样必须按照GB5009.36-2016中5.2.2蒸馏后取馏出液测定，以消除浑浊，准确定量。
3. 结论
白酒是节日庆典、亲友聚会的必需品，氰化物含量是酒类的重要指标之一，白酒中氰化物的检测是酒厂出厂检验和食品安全抽检的常规项目。本研究验证了白酒中氰化物检测的国标方法，并对实验关键点进行探讨，旨在满足本中心检测需求的同时，为其它实验室验证方法提供参考。
关键词：白酒；氰化物；分光光度法
氰化物是剧毒物质，进入机体会使细胞色素氧化酶失活，导致人体缺氧窒息。白酒中的氰化物主要由植物原料中的氰甙类配糖体在制酒过程中经水解产生，GB2757-2012中规定其限量为8.0mg/L，饮用氰化物超标的白酒会严重危害饮酒者的生命健康。目前，GB5009.36-2016中规定了分光光度法、气相色谱法两种氰化物定量检测方法，对于基层实验室而言，前者设备成本较低、操作简便快速。因此，本研究对白酒中氰化物测定的分光光度法进行了验证，并探讨了实验环节中的关键点。
1. 材料与方法
1.1 材料、试剂及仪器
白酒（购自某超市）；氰化物标准溶液（GBW（E）080115，50μg/mL）。
氢氧化钠；酚酞指示剂；乙酸；异烟酸；吡唑啉酮；氯胺T；去离子水等。
721G可见分光光度计（上海仪电公司）；电热板；恒温水浴锅。
1.2 实验方法
1.2.1 标准系列配制
准确吸取1.0mL氰化物标准溶液，用氢氧化钠溶液（2g/L）定容至50mL，制得1μg/mL的标准中间液。分别吸取0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0mL上述中间液于10mL比色管中，加入氢氧化钠溶液至5mL，待处理。
1.2.2 白酒试样制备
准确吸取1.0mL酒样至50mL烧杯中，加5mL氢氧化钠溶液（2g/L），放置10min，用120℃电热板加热至约剩1mL转移至10mL比色管中，以氢氧化钠溶液（2g/L）多次洗涤烧杯后并入洗涤液至5mL。
1.2.3 试样溶液测定
于放置标准系列和酒样的比色管中滴入2滴酚酞指示剂，加入乙酸溶液（1+24）至红色褪去，再以氢氧化钠溶液（2g/L）调至近红色后，依次加入2mL磷酸盐缓冲溶液、0.2mL氯胺T溶液（10g/L），摇匀后放置3min，然后加入2mL异烟酸-吡唑啉酮溶液，用去离子水定容，振荡摇匀，最后于37℃下水浴40min后在波长638nm测定吸光度，以标准系列点所含氰化物质量为横坐标，对应的吸光度为纵坐标，制作标准曲线，并以此定量酒样中的氰化物含量。
2. 结果与讨论
2.1 线性关系及检出限
测定标准系列的吸光度值，绘制标准曲线，回归方程为y=0.2923x-0.0667，R2=0.9991。按照取样量为1.0mL，定容体积为10mL，做20次空白平行试验，测定并记录吸光度值，根据公式DL=3SD/b（b为标曲斜率）计算得本方法的檢出限为0.02mg/L。
2.2 加标回收率与精密度
在白酒试样（本底为0.33mg/L）中添加低（0.5mg/L）、中（1.0mg/L）、高（1.5mg/L）不同浓度水平的标准溶液，各浓度水平平行测定2次，考察加标回收率；将上述白酒试样平行测定6次，考察精密度，经计算得本方法的加标回收率在90.00%-101.33%之间，相对标准偏差RSD=1.2%。
2.3 实验室间比对试验
为验证本实验方法的有效性，确保出具的数据准确可靠，本实验室与河南华测检测技术有限公司实验室进行比对试验，某批次的古月牌清香型白酒两家实验室测得氰化物含量均为0.29mg/L，比对结果满意。
2.4 实验操作关键点探讨
分光光度法测定白酒中的氰化物需要将氰化物转化为氯化氰，而该过程必须在体系pH=7.0条件下进行，实验中需要两次调节pH，然而酸碱用量须少于0.8mL才能确保最后定容准确。分光光度法基于朗伯比尔定律来定量，若显色液浑浊对吸光度值影响很大，因此，酸碱调节过程要掌握好酸碱用量，以免超过定容体积导致实验失败。此外，对于浑浊或有色酒样必须按照GB5009.36-2016中5.2.2蒸馏后取馏出液测定，以消除浑浊，准确定量。
3. 结论
白酒是节日庆典、亲友聚会的必需品，氰化物含量是酒类的重要指标之一，白酒中氰化物的检测是酒厂出厂检验和食品安全抽检的常规项目。本研究验证了白酒中氰化物检测的国标方法，并对实验关键点进行探讨，旨在满足本中心检测需求的同时，为其它实验室验证方法提供参考。