【摘 要】
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目的 探讨靶向沉默Rictor表达对肝癌细胞增殖、迁移和增殖的影响.方法 采用LipofectamineTM2000向SMMC-7721和Hep3B细胞转染成功构建靶向沉默Rictor表达的siRNA载体片段(沉默
【机 构】
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海口市人民医院肿瘤化疗科,海南海口 570208;南方医科大学中西医结合医院肿瘤中心,广东广州 410000;南方医科大学中西医结合医院肿瘤中心,广东广州,410000
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目的 探讨靶向沉默Rictor表达对肝癌细胞增殖、迁移和增殖的影响.方法 采用LipofectamineTM2000向SMMC-7721和Hep3B细胞转染成功构建靶向沉默Rictor表达的siRNA载体片段(沉默组)或无义siRNA片段(对照组),转染48 h后采用QPCR检测Rictor mRNA水平,以Western blotting检测Rictor、p-Akt、细胞周期蛋白和EMT相关蛋白的表达情况.MTT实验、EdU增殖实验、Transwell实验和Boyden实验分别检测肝癌细胞的增殖、迁移和增殖能力.结果 转染48 h后,沉默组细胞的RictormRNA蛋白水平大部分都低于对照组细胞;沉默组细胞的增殖、迁移、侵袭能力均低于对照组细胞,差异有统计学意义(P＜0.01).MTT实验及EdU增殖实验表明,两组肝癌细胞在沉默Rictor表达后增殖减慢、S期细胞比例明显减少(P均＜0.01);Transwell实验和Boyden实验表明,两组肝癌细胞在沉默Rictor表达后穿膜细胞数显著减少(P均＜0.01).结论 Rictor基因在肝癌细胞中起到癌基因的作用,沉默Rictor的表达抑制肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭的过程,可能与下调p-Akt、CCND1和N-cadherin、ZEB1、Vimentin蛋白表达,上调E-cadherin,P21和P27蛋白表达有关.
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