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【摘要】目的 探讨不同抗菌药物体外对沙眼衣原体的单独和联合抗菌的作用；方法 使用培养液稀释法来测定体外抗菌药物体对沙眼衣原体的单独以及联合抗菌作用，并着重分析抗菌药物联合之后相互作用状况；结果 对体外沙眼衣原体而言，大观霉素以及头孢曲松同抗菌药物联合之后在体外对于沙眼衣原体为无关作用。大观霉素以及红霉素、多西环素进行联合的时候，分别有25%以及50%菌株表现为协同作用，差异有统计学意义（P<0.05），头孢曲松以及多西环素联合的情况下8%的菌株体现出拮抗作用，氧氟沙星以及头孢曲松联合的情况下17%的菌株体现出协同作用；结论 体外联合使用莫西沙星以及阿奇霉素，抗菌活性显著提高，在生殖道感染患者治疗过程当中有重要应用价值。
【关键词】抗菌药物；沙眼衣原体；体外；抗菌；作用
【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）05-0158-02
生殖道的沙眼农原体感染可以说是世界范围内最为常见的性传播疾病之一，有着发病率高以及流行广泛的特点，给人体健康带来严重危害，已经发展成为重要的公共卫生问题之一。因为泌尿生殖道的沙眼农原体感染在临床症状方面往往无特异性并且呈现出隐匿性，容易遭到医护人员的忽视，使得病情迁延甚至反复感染，抗菌药物敏感性严重下降，治疗失败的患者数量不断上升[1]。本研究选取12例体外沙眼衣原体菌株，分析不同抗菌药物单独以及联合使用的抗菌效果。
1资料与方法
1.1一般资料
菌株来源方面，选取12例我院收治的泌尿生殖道疾病患者标本。采集患者标本并接种于McCoy细胞，培养筛查得到阳性标本，增殖传代3次到一定的浓度之后，使用氨酸磷酸盐液保存，低温（-70℃）条件下冻存待检。
抗菌药物方面，选用大观霉素、头孢曲松、氧氟沙星、多西环素以及红霉素，均购买于药品生物制品所。抗菌药物根据试剂说明溶解之后，使用维持培养基（培养基+2‰的放线菌酮+0.25%的葡萄糖）稀释分装抗菌药物，-20℃条件下冻存[2]。
1.2方法
1.2.1最低抑菌浓度的测定方法。首先使用96孔板制备单层细胞，然后接种沙眼衣原体每ml4×104）到单层细胞，转速设定为2500r/min，温度设定为3O℃，离心50min，去除生长培养基，添加含有浓度（经5次倍比稀释）的抗菌药物培养基，在37℃以及5%的CO2环境中培养48h。去除维持培养基使用丙酮固定，并使用FITC标记之后的抗沙眼衣原体抗体染色1h，荧光显微镜视野观察沙眼衣原体的生长状况。可以抑制包涵体生长的药物浓度是该药的最低抑菌浓度（MIC）。每个实验都需要重复进行3次，同时设定阳性对照以及阴性对照，其中阳性对照不加药但是接种沙眼衣原体，阴性对照加入药物但是并不接种沙眼衣原体）[3]。
1.2.2联合药敏试验方法。基本过程类似于MIC测定试验。使用棋盘格模型稀释需要测量的药物，设定抗菌药物的浓度范围为3-1/12倍的MIC。使用无菌96孔板进行药物稀释。分别在纵向以及横向上对A药以及B药做好倍比稀释，确保获得含有系列浓度的药物A以及B的培养基。使用稀释板当中含有的药物A以及药物B的培养基，离心之后替换接种板上各个孔内的内生长培养基。试验结果中FIC（部分抑菌浓度）的指数越高，表明拮抗作用越强，同时FIC指数越低，表明协同作用越强。
1.3统计学方法
将所检测的数据用统计学专业软件数据包SPSS18.0进行分析，数据用（x±s）表示，以P<0.05具有差异统计学意义。
2结果
大观霉素以及头孢曲松同抗菌药物联合之后在体外对于沙眼衣原体为无关作用。大观霉素以及红霉素、多西环素进行联合的时候，分别有25%以及50%菌株表现为协同作用，差异有统计学意义（P<0.05），头孢曲松以及多西环素联合的情况下8%的菌株体现出拮抗作用，氧氟沙星以及头孢曲松联合的情况下17%的菌株体现出协同作用，具体结果见表1。
3结论
沙眼衣原体作为临床上的常见病原体，迄今为止并没有有效疫苗，所以抗生素是治疗衣原体引发泌尿生殖道感染的常规途径，尤其是喹喏酮类的抗生素有着比较明显的抗沙眼衣原体活性，因此在近年来被推荐作为沙眼衣原体宫颈炎以及尿道炎感染治疗的药物，同时用来治疗沙眼衣原体感染诱发的慢性盆腔炎，临床上有着比较理想的使用价值。其中氧氟沙星在临床上的应用不够广泛，其抑菌以及杀菌的浓度最低，并且抗沙眼衣原体的活性也最强，并且氧氟沙星的半衰期比较长，能够每天单次给药，因此在治疗泌尿生殖道的沙眼衣原体感染过程当中，使用前景理想。不过需要注意的是，体外药物敏感性实验的抗沙眼衣原体活性强，并不等同与治疗沙眼衣原体泌尿生殖道炎症的临床效果一定满意，仍需要进行体内药物的敏感性实验。
综上所述，体外联合使用莫西沙星以及阿奇霉素，抗菌活性显著提高，在生殖道感染患者治疗过程当中有重要应用价值。
参考文献：
[1]韩建德，陈木开，李斌，等.沙眼衣原体致小鼠输卵管炎的病理研究[J].中山大学学报：医学科学版，2014，26（5）：520-522.
[2]韩建德，张云青，涂裕英，等.泌尿生殖道沙眼衣原体体外药物敏感性测定[J].中国抗生素杂志，2013，27（7）：441-442.
[3]杨晓静，杨昕娜，江勇，等.天津地区泌尿生殖道沙眼衣原体临床株药敏分析[J].中华皮肤科杂志，2014.42（1）：56-57.
【关键词】抗菌药物；沙眼衣原体；体外；抗菌；作用
【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）05-0158-02
生殖道的沙眼农原体感染可以说是世界范围内最为常见的性传播疾病之一，有着发病率高以及流行广泛的特点，给人体健康带来严重危害，已经发展成为重要的公共卫生问题之一。因为泌尿生殖道的沙眼农原体感染在临床症状方面往往无特异性并且呈现出隐匿性，容易遭到医护人员的忽视，使得病情迁延甚至反复感染，抗菌药物敏感性严重下降，治疗失败的患者数量不断上升[1]。本研究选取12例体外沙眼衣原体菌株，分析不同抗菌药物单独以及联合使用的抗菌效果。
1资料与方法
1.1一般资料
菌株来源方面，选取12例我院收治的泌尿生殖道疾病患者标本。采集患者标本并接种于McCoy细胞，培养筛查得到阳性标本，增殖传代3次到一定的浓度之后，使用氨酸磷酸盐液保存，低温（-70℃）条件下冻存待检。
抗菌药物方面，选用大观霉素、头孢曲松、氧氟沙星、多西环素以及红霉素，均购买于药品生物制品所。抗菌药物根据试剂说明溶解之后，使用维持培养基（培养基+2‰的放线菌酮+0.25%的葡萄糖）稀释分装抗菌药物，-20℃条件下冻存[2]。
1.2方法
1.2.1最低抑菌浓度的测定方法。首先使用96孔板制备单层细胞，然后接种沙眼衣原体每ml4×104）到单层细胞，转速设定为2500r/min，温度设定为3O℃，离心50min，去除生长培养基，添加含有浓度（经5次倍比稀释）的抗菌药物培养基，在37℃以及5%的CO2环境中培养48h。去除维持培养基使用丙酮固定，并使用FITC标记之后的抗沙眼衣原体抗体染色1h，荧光显微镜视野观察沙眼衣原体的生长状况。可以抑制包涵体生长的药物浓度是该药的最低抑菌浓度（MIC）。每个实验都需要重复进行3次，同时设定阳性对照以及阴性对照，其中阳性对照不加药但是接种沙眼衣原体，阴性对照加入药物但是并不接种沙眼衣原体）[3]。
1.2.2联合药敏试验方法。基本过程类似于MIC测定试验。使用棋盘格模型稀释需要测量的药物，设定抗菌药物的浓度范围为3-1/12倍的MIC。使用无菌96孔板进行药物稀释。分别在纵向以及横向上对A药以及B药做好倍比稀释，确保获得含有系列浓度的药物A以及B的培养基。使用稀释板当中含有的药物A以及药物B的培养基，离心之后替换接种板上各个孔内的内生长培养基。试验结果中FIC（部分抑菌浓度）的指数越高，表明拮抗作用越强，同时FIC指数越低，表明协同作用越强。
1.3统计学方法
将所检测的数据用统计学专业软件数据包SPSS18.0进行分析，数据用（x±s）表示，以P<0.05具有差异统计学意义。
2结果
大观霉素以及头孢曲松同抗菌药物联合之后在体外对于沙眼衣原体为无关作用。大观霉素以及红霉素、多西环素进行联合的时候，分别有25%以及50%菌株表现为协同作用，差异有统计学意义（P<0.05），头孢曲松以及多西环素联合的情况下8%的菌株体现出拮抗作用，氧氟沙星以及头孢曲松联合的情况下17%的菌株体现出协同作用，具体结果见表1。
3结论
沙眼衣原体作为临床上的常见病原体，迄今为止并没有有效疫苗，所以抗生素是治疗衣原体引发泌尿生殖道感染的常规途径，尤其是喹喏酮类的抗生素有着比较明显的抗沙眼衣原体活性，因此在近年来被推荐作为沙眼衣原体宫颈炎以及尿道炎感染治疗的药物，同时用来治疗沙眼衣原体感染诱发的慢性盆腔炎，临床上有着比较理想的使用价值。其中氧氟沙星在临床上的应用不够广泛，其抑菌以及杀菌的浓度最低，并且抗沙眼衣原体的活性也最强，并且氧氟沙星的半衰期比较长，能够每天单次给药，因此在治疗泌尿生殖道的沙眼衣原体感染过程当中，使用前景理想。不过需要注意的是，体外药物敏感性实验的抗沙眼衣原体活性强，并不等同与治疗沙眼衣原体泌尿生殖道炎症的临床效果一定满意，仍需要进行体内药物的敏感性实验。
综上所述，体外联合使用莫西沙星以及阿奇霉素，抗菌活性显著提高，在生殖道感染患者治疗过程当中有重要应用价值。
参考文献：
[1]韩建德，陈木开，李斌，等.沙眼衣原体致小鼠输卵管炎的病理研究[J].中山大学学报：医学科学版，2014，26（5）：520-522.
[2]韩建德，张云青，涂裕英，等.泌尿生殖道沙眼衣原体体外药物敏感性测定[J].中国抗生素杂志，2013，27（7）：441-442.
[3]杨晓静，杨昕娜，江勇，等.天津地区泌尿生殖道沙眼衣原体临床株药敏分析[J].中华皮肤科杂志，2014.42（1）：56-57.