rhEPO-Fc融合蛋白的表达、纯化及质量研究

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:haixinmei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
用无血清培养基培养分泌表达rhEPO-Fc融合蛋白的工程细胞株MY06(CHO细胞),收集发酵培养上清,通过离心、过滤、亲和层析、离子交换层析、分子筛等方法对目的蛋白进行纯化,通过lowry法、SDS-PAGE、Western-blot、HPLC、ELISA及IEF等方法研究目的蛋白质量,以建立rhEPO-Fc融合蛋白的发酵、纯化工艺,并探寻该融合蛋白的质量检测方法。通过该工艺,rhEPO-Fc蛋白表达量高达2g/L,蛋白纯化得率达45%以上,纯度可达98%以上,相对分子质量约为60kDa,t1/2长达38h,免疫印迹证明具有天然EPO的免疫原性。研究结果表明该生产工艺可获得rhEPO-Fc的高效表达,纯化得率高,质量检验方法稳定可靠,适用于大规模生产。
其他文献
目的:制备以Ⅰ型促性腺激素释放激素(GnRHⅠ)为导向部分,以绿脓杆菌外毒素的结构域Ⅱ(PEⅡ)为转膜区,以丝瓜毒素luffinS2为毒性部分的重组嵌合毒素GnRH-PEⅡ-luffinS,体外实验检测其
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
用废啤酒酵母吸附水溶液中Cu^2+,考察了溶液pH值、Cu^2+浓度和吸附时间对Cu^2+吸附的影响。结果表明:废啤酒酵母吸附Cu^2+在4~6h内达到吸附平衡,酸性条件利于吸附,以pH为5时最佳,吸附等
我厂今年承接四川省小龙门航电枢纽船闸工程,其中上下游四扇人字门底枢零件蘑菇头、铜轴瓦(见简图1、2)比较特殊,蘑菇头重量350kg,铜轴瓦重量438kg,特点是直径大,重晕重,配合精度要求
我国经过一系列的财政税收体制改革后,创新了管理制度,提出了新的预算绩效管理制度,该管理制度应用于行政事业单位,弥补了行政事业单位在绩效管理方面的不足,提高了行政事业
<正>降脂药物可以改善高脂血症患者预后而被广泛应用于临床,在其应用过程中发现其可能导致无症状血清谷丙转氨酶升高[1,2]。由于在高脂血症患者中,常伴有非酒精性脂肪肝,而后
随着经济的快速发展,人类社会的物质文明得到了空前的发展壮大,人们在享受物质生活的同时,对健康的追求与日俱增。高度发达的工业文明,不仅为人们提供大量的工业产品,也送来了环境
<正>1 UPS运行方式UPS有4种操作运行模式:正常操作模式、停电模式(电池供电)、备用电源模式和维护旁路模式。其中:①正常操作模式:在正常交流电源供应下,整流器将交流电转换
利用大孔吸附树脂分离提取地黄中梓醇。以地黄粗提液中梓醇含量为指标,高效液相色谱(HPLC)为含量测定方法,考察9种不同极性大孔吸附树脂对梓醇的吸附和解吸附性能,筛选出最佳树
程俊英所著的《诗经译注》对每一首诗做了题解、注释与译文,是重要的《诗经》版本,流传甚广。本文以男女情感为线索,结合《诗经译注》的题解与注释,按照恋爱、婚嫁、婚姻的阶