光滑球拟酵母金属硫蛋白基因的亚克隆和表达研究

来源 :微生物学通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：caojun3538073

【摘要】

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用ＢａｍＨＩ和ＰｓｔＩ双酶切质粒ｐＭＴⅡａ－９１ｓ获得光滑球拟酵母金属硫蛋白基因（ＭＴⅡａ）片段，并其亚克隆到Ｍ１３载体，扩增并回收ＭＴＩＩａ基因片段，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交验证插入片段正确后，分别将ＭＴＩＩａ基因片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０和大肠杆菌－酵母

【作者】

：

张博润蔡向荣

【机构】

：

中国科学院微生物研究所

【出处】

：

微生物学通报

【发表日期】

：

1999年3期

【关键词】

：

光滑球拟酵母金属硫蛋白基因克隆和表达 Candida glabrata metallothioneingene cloning and expressi

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用ＢａｍＨＩ和ＰｓｔＩ双酶切质粒ｐＭＴⅡａ－９１ｓ获得光滑球拟酵母金属硫蛋白基因（ＭＴⅡａ）片段，并其亚克隆到Ｍ１３载体，扩增并回收ＭＴＩＩａ基因片段，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交验证插入片段正确后，分别将ＭＴＩＩａ基因片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０和大肠杆菌－酵母菌穿梭载体ＴＩｐ３５２中，转化大肠杆菌ＤＨ５α，使其对ＣｕＳＯ４的抗性提高０．７ｍｏｌ／Ｌ左右，转化酿酒酵母受体菌ＹＳ５９，使ＹＳ５

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