【摘 要】
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目的 探究ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)对磷酸肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的调控作用,及对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠自噬功能的影响.方法 用雨蛙素诱导建立小鼠SAP模型,将造模成功的SAP小鼠使用随机数字表法分为模型组、ω-3PUFA(2.5 g/kg)组、3MA(PI3K及自噬抑制剂-3-甲基腺嘌呤,10mg/kg)组、740Y-P组(PI3K/Akt激活剂,20 mg/kg)、ω-3PUFA +740Y-P(2.5 g/kg +20 mg/kg)组,每组15只.另取15
【机 构】
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610000 四川省第二中医医院手术室;610000 四川省第二中医医院普外科
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目的 探究ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3PUFA)对磷酸肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路的调控作用,及对重症急性胰腺炎(SAP)小鼠自噬功能的影响.方法 用雨蛙素诱导建立小鼠SAP模型,将造模成功的SAP小鼠使用随机数字表法分为模型组、ω-3PUFA(2.5 g/kg)组、3MA(PI3K及自噬抑制剂-3-甲基腺嘌呤,10mg/kg)组、740Y-P组(PI3K/Akt激活剂,20 mg/kg)、ω-3PUFA +740Y-P(2.5 g/kg +20 mg/kg)组,每组15只.另取15只未造模小鼠作为正常对照组.检测血清淀粉酶、炎症因子-白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;透射电镜观察自噬泡形成;HE染色检测胰腺组织结构变化;免疫荧光法检测自噬标记蛋白-微管相关蛋白轻链3B(LC3B)、PI3K阳性表达水平;TUNEL法检测胰腺腺泡细胞凋亡情况;免疫组化法检测核转录因子κB(NF-κB)磷酸化指标(p-NF-κB)、促凋亡相关蛋白(Cleaved-caspase-3)阳性表达水平;Western blot检测Akt、磷酸化Akt (p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、自噬相关蛋白(Beclin1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、促凋亡相关因子(Bax)蛋白表达.结果 与正常对照组相比,模型组小鼠死亡、胰腺坏死及炎性浸润、血清淀粉酶及炎性因子表达升高等SAP病理现象严重,腺泡细胞PI3K/Akt通路及其介导的自噬、凋亡、炎性反应等途径处于活化状态,且各指标变化差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组相比,ω-3PUFA组及3MA组小鼠无死亡,SAP病理症状缓解,腺泡细胞PI3K/Akt通路及其介导的自噬、炎性反应途径被抑制,凋亡保护途径进一步激活(P＜0.05);740Y-P组小鼠死亡增加,SAP病理症状进一步加重,腺泡细胞PI3 K/Akt通路及其介导的自噬、炎性反应途径进一步活化,但凋亡保护途径被抑制(P＜0.05).与ω-3PUFA组相比,ω-3PUFA+ 740Y-P组小鼠死亡增加,SAP症状加重,腺泡细胞PI3 K/Akt通路及其介导的自噬、炎性反应活化,凋亡保护途径被抑制(P＜0.05).结论 ω-3PUFA可通过抑制PI3K/Akt通路介导的炎症及自噬异常途径活化,促进腺泡促凋亡保护途径激活,来缓解SAP小鼠死亡及胰腺组织炎性坏死.
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