【摘 要】
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PCR扩增hrpZ基因片段,克隆到pGEM-T载体中,经EcoR I/Xho I酶切、连接将hrpZ基因插入大肠杆菌表达载体pET32b(+)硫氧还蛋白下游,构建重组表达质粒pET-hrpZ,再将其转化至E.coli
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PCR扩增hrpZ基因片段,克隆到pGEM-T载体中,经EcoR I/Xho I酶切、连接将hrpZ基因插入大肠杆菌表达载体pET32b(+)硫氧还蛋白下游,构建重组表达质粒pET-hrpZ,再将其转化至E.coli BL21(DE3)中,经筛选得到阳性克隆子,IPTG诱导表达HrpZ蛋白.SDS-PAGE显示,目的蛋白在重组菌株中得到了可溶性高效表达.该重组蛋白分子量为55.8 kD,与理论值大小相符.采用叶片穿刺法,融合蛋白具有诱导烟草过敏反应的生物功能.
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