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根据桦褐孔菌(Inonotus obliquus)酸性蛋白酶(Acid protease,AP)基因(10-AP)序列密码子的偏好性优化选择酶切位点和载体,成功构建pGEX-4T1-1AP原核表达载体;用热激法将该载体转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,构建桦褐孔菌酸性蛋白酶(IO-AP)重组菌。以此重组菌表达的IO-AP以包涵体形式存在,重组蛋白分子质量约为60kDa。以获得的较高纯度的重组IO-AP作为免疫原,采用传统3-2-2-2免疫方式免疫4只Balb/C小鼠,