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目的 探讨用超速玻璃化法冻存的人肝组织(细胞)微团构建人工肝生物反应器的代谢和合成功能.方法 将手术来源的人肝组织用胶原酶做有限消化,分解成肝组织微团,将肝组织微团用超速玻璃化法冻存,复苏后再用胶原酶有限消化成更小的肝细胞微团.将肝细胞微团与胶原溶液(pH 7.4)混合,并将混合物注入中空纤维反应器管外腔,使混合物在管外腔形成胶原凝胶将肝细胞微团固定其中,构成生物反应器.用利多卡因循环灌注反应器管内腔24 h,检验反应器的药物代谢功能;用乙型肝炎患者血浆循环灌注反应器管内腔6.5 h,检测灌注液中血氨、间接胆红素(IBIL)、凝血酶原时间(PT)的变化,检验反应器的肝细胞功能.结果 人肝组织微团经超速玻璃化冻存7d后复苏的肝细胞活率为(81.9±4.2)％.用利多卡因灌注24 h后,利多卡因浓度为6.2 mg/L,代谢转换率为92％.100 mL患者血浆循环灌注生物反应器6.5 h后,灌注液中血氨、IBIL和PT值分别为(22.5±6.1) μmol/L、(29.3±8.6) μmol/L和(20.5±2.7)s,低于灌注0.5 h的相应值,差异均有统计学意义(t=13.5、17.9和7.4,P均＜0.05).结论 超速玻璃化法冻存的人肝组织(细胞)微团复苏后固定于胶原凝胶中构建的中空纤维型人工肝生物反应器,有较好的肝细胞代谢和合成功能。