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采用高效液相色谱法测定血浆中维生素I）3和25-OH～D3的含量。样品经乙醇-乙腈（60＋40）混合溶液提取后，提取液用氮气吹干，残渣用正己烷溶解后，过Waterssilica固相萃取拄净化，净化液用氮气吹干后，将残余物溶于pH6．5的5mm01．L叫磷酸盐溶液-乙腈-甲醇（30＋15＋55）缓冲溶液中。待测物在SymmetryC18色谱柱上分离，以pH6．5的乙腈-5mm01·L-1磷酸盐（20＋80）混合液为流动相A，以甲醇-乙腈-四氢呋喃（65＋20＋15）混合液为流动相B，进行梯度洗脱；