【摘 要】
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目的 观察长链非编码RNA（LncRNA）KCNQ1OT1降表达对顺铂（DDP）耐药卵巢癌细胞耐药性的影响并分析其作用机制。方法 选用SKOV-3人卵巢癌细胞，经DDP反复间歇冲击诱导法构建DDP耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP；以不同浓度DDP作用SKOV3、SKOV3/DDP细胞，CCK-8法检测细胞增殖情况得到50%细胞生长的药物浓度（IC50）并计算SKOV3/DDP细胞耐药指数（RI）
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区自然科学基金青年基金项目（2018D01C309）；
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目的 观察长链非编码RNA（LncRNA）KCNQ1OT1降表达对顺铂（DDP）耐药卵巢癌细胞耐药性的影响并分析其作用机制。方法 选用SKOV-3人卵巢癌细胞，经DDP反复间歇冲击诱导法构建DDP耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP；以不同浓度DDP作用SKOV3、SKOV3/DDP细胞，CCK-8法检测细胞增殖情况得到50%细胞生长的药物浓度（IC50）并计算SKOV3/DDP细胞耐药指数（RI）；采用qRT-PCR法检测SKOV-3、SKOV3/DDP细胞中的KCNQ1OT1。将SKOV3/DDP细胞分为三组，KCNQ1OT1降表达组和转染对照组中分别转染KCNQ1OT1 siRNA、NC-siRNA 48 h，对照组不转染，采用qRT-PCR法检测KCNQ1OT1观察转染效果；以不同浓度DDP作用各组细胞，以CCK-8法检测细胞增殖情况得到IC50并计算RI观察耐药性变化；取转染后的三组细胞，采用流式细胞术检测细胞周期，Western blotting法检测细胞p-AKT、p-mTOR蛋白。结果 DDP对SKOV-3、SKOV-3/DDP细胞IC50分别为1.224、4.920μg/mL,SKOV-3/DDP细胞RI为4.020。与SKOV-3细胞比较，SKOV-3/DDP细胞KCNQ1OT1表达量增高（P＜0.05）。KCNQ1OT1降表达组细胞中KCNQ1OT1表达量均低于转染对照组及对照组（P均＜0.05），转染对照组与对照组间差异无统计学意义。随DDP浓度增加，各组细胞增殖抑制率均升高（P均＜0.05）；在相同DDP浓度下，KCNQ1OT1降表达组细胞增殖抑制率均高于转染对照组和对照组（P均＜0.05）。DDP对KCNQ1OT1降表达组细胞IC50为3.613μg/mL,RI为0.734;DDP对转染对照组、对照组细胞IC50分别为9.737、8.461μg/mL,RI分别为1.979、1.720。与转染对照组和对照组比较，KCNQ1OT1降表达组G0/G1期细胞比例、p-mTOR蛋白表达量升高，S期和G2/M期细胞比例、p-AKT蛋白表达量降低（P均＜0.05）；转染对照组与对照组各期细胞比例及p-AKT、p-mTOR蛋白表达量差异均无统计学意义。结论 干扰KCNQ1OT1表达可有效逆转卵巢癌细胞对DDP的耐药，其机制可能与阻滞耐药细胞于G0/G1期并调控AKT/mTOR信号通路活性有关。
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